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请帮忙参谋一下该如何修改流动相比例

液相色谱(LC)

  • 下图是我设的一个梯度洗脱

    A是甲醇,D是有少许磷酸的水溶液
    可是用这个梯度洗脱发现有三个目标峰都集中在18-20分钟出峰,分离效果不好,可是我看了下,16分钟开始就已经算是走等度了
    我现在考虑想在这个阶段再洗脱的慢一点,我自己想了两个方案
    1、十六分钟的时候用35%的A和65%的D来洗脱,十六到三十分钟仍旧走等度,相对的这段时间的洗脱能力就降低了
    2、流动相比例不变,直接都降低流速,流速从1降到0.8
    也不知道效果如何?
    想听听大家有什么好的建议?因为走一针时间比较长,所以比较希望调节时更有针对性
  • 该帖子已被版主-武灵加3积分,加2经验;加分理由:鼓励发图讨论
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  • 武灵

    第1楼2015/07/29

    16分钟时,其实流动相并没有让色谱柱充分平衡。

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  • doublexue

    第2楼2015/07/29

    那应该怎么做

    武灵(zhonghuashendun) 发表:16分钟时,其实流动相并没有让色谱柱充分平衡。

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  • 夏天的雪

    第3楼2015/07/29

    应助达人

    尝试了才知道好坏,觉得第一种可能好些

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  • doublexue

    第4楼2015/07/29

    如果用第一种,要不要加长这段等度的时间,现在是从16min到30min,要不要再加长一些,因为现在洗脱变慢了

    夏天的雪(bingwang228) 发表:尝试了才知道好坏,觉得第一种可能好些

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  • doublexue

    第5楼2015/07/29

    10到16分,梯度变的太抖了?是不是应该这里时间拉长一些?
    但是在10到16分钟没有我的目标峰啊

    武灵(zhonghuashendun) 发表:16分钟时,其实流动相并没有让色谱柱充分平衡。

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  • 浪淘沙隐

    第6楼2015/07/29

    感觉前面10%有机相没必要维持这么长时间,试试改成维持5分钟,然后20或30分钟比例上升到60%。

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  • happy水中月

    第7楼2015/07/29

    你需要走几个图谱看看哪种改变是主要影响因素

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  • 武灵

    第8楼2015/07/30

    把前10min缩短到5分钟,16min也提前到10-12min左右,再走走试试。

    doublexue(doublexue) 发表: 10到16分,梯度变的太抖了?是不是应该这里时间拉长一些?
    但是在10到16分钟没有我的目标峰啊

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  • nixiaolong

    第9楼2015/07/30

    如果是16-18 分钟出峰,你这个梯度分析时间太长 有点浪费,减少前面等度时间,把梯度设缓一点试试

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  • doublexue

    第10楼2015/07/30

    不行,前十分钟里也有两个目标峰的

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:感觉前面10%有机相没必要维持这么长时间,试试改成维持5分钟,然后20或30分钟比例上升到60%。

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