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扫描电子显微镜之材料准备篇

超1

2015/08/04

扫描电镜（SEM/EDS）

之前写过一篇《扫描电子显微镜原理及应用》，不过鉴于这方面的知识已经很普及了，所以这次打算结合自身的实验经历来谈谈有关扫描电子显微镜的使用事项。先说说扫描电镜的材料准备。
1 材料是否适合通过扫描电镜观察
通过扫描电镜观察的是样品的表面形态，经常有人问说可不可以看到细胞内部结构变化之内的，我只能回答不能。观察细胞或者其内部结构可以去照高倍数的显微镜，类似共聚焦显微镜。另外，扫描电镜放大倍数可以上千倍，所以观察的样品体积不能过大，反而是组织越小越值得去照扫描电镜，那样意义大一些，组织大的用普通显微镜就好。像我做的花序原基，最好是1cm以内，一般是1mm-2mm之间。
2 材料取样
因为一般要照的组织十分微小，肉眼下几乎不能辨别，因此确定好要照的材料部位后，在解剖镜下选取材料，直接将结构完整的材料用固定液固定。尽量多固定一些样品，样品很小，在制样的过程中不可避免出现样品丢失，样品被破损等情况。
3 样品制备
样品制备过程中要经过脱水，干燥处理。脱水需要将样品依次转移到30%、50%、70%、90%、100%的酒精中，然后再转移到醋酸异戊脂中干燥。这一步的关键是如何尽量减少转移过程中样品的损失率。本人采取的是将样品放于离心管中，用枪头加入试剂，用打针的针筒将试剂吸出，因为真空很细，这样样品一般不会被吸走丢失。
4 粘样
将样品粘贴在金属样品台上的顺序也是有讲究的，尽量按顺序排列样品，大小一致的放在一排，这样的目的使方便电镜观察时的电镜操作，节约拍摄时间，提高拍摄效率。

样品粘贴好后，喷上金就可以拍摄了。扫描电子显微镜比较昂贵，需要专人管理，一般学校会雇人负责相关事宜，学生只需取好样品，制样由工作人员完成，可以省去实验操作。可是殊不知制样过程对实验结果影响也很大，个人建议不要偷懒，尽量自己完成所有步骤。附一张玉米原基图片。

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wccd1

第1楼2015/08/04

为什么不在电镜版发表，在这个版评审时会吃亏的。

0

仙后婧婧（谭思婧）

第2楼2015/08/05

楼主的样品图是花吗？

0

荷花仙子

第3楼2015/08/10

扫描电镜价格很高

0

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