仪器信息网APP

选仪器、听讲座、看资讯

立即体验

当前位置：仪器社区 >特色服务 > 厂商论坛 > 帖子详情

异构体混合物分离制备放大经历

liuwei10987

2015/10/10

异构体在色谱上通常比较难分，要想制备出单体，更是困难，下面讲一下前段时间做的一个异构体制备的经历。
样品为异构体混合物，易溶于甲醇，微溶于水，为尽量避免溶剂效应，用甲醇溶样后，用水稀释一倍，过滤，备用。
原样检测结果是下图这个样子，目的是分离主成分，纯度达到99%

序号保留时间名称浓度峰面积
───────────────────────
1 7.515 92.97 1146511
2 8.107 7.027 60677
───────────────────────
总计 100 1207188
制备条件1
仪器：高压制备一体机（agela CHEETAH-HP100）
色谱柱：DAC-50 Venusil XBP C18(2) 300g（填装）（10um 100Å）
流动相：A：水
B：甲醇
流速：80ml/min
波长：210nm，230nm

流动相A：B=77:23
上样量：170mg

170mg上样量制备图谱

23.1-25.8min馏分检测图谱
序号保留时间名称浓度峰面积
───────────────────────
1 7.505 99.9 7727046
2 8.078 0.1048 8110
───────────────────────
总计 100 7735156
结论：上样量170mg，得到纯度99.9%产品66mg，收率38.8%

制备条件2（优化流动相比例）
流动相A：B=78:22
上样量：422mg

422mg上样量制备图谱

26.6-30.3min馏分检测图谱
序号保留时间名称浓度峰面积
───────────────────────
1 7.881 99.19 1762194
2 8.493 0.8076 14346
───────────────────────
总计 100 1776540
结论：上样量422mg，得到纯度99.19%产品182mg，经过条件优化，收率提升至43.1%

制备条件3（加大上样量，并优化流动相比例）
流动相A：B=80:20
上样量：1000mg

1000mg上样量制备图谱

33.2-38.8min馏分检测图谱
序号保留时间名称浓度峰面积
───────────────────────
1 10.594 99.02 7134816
2 11.456 0.9755 70285
───────────────────────
总计 100 7205101
结论：上样量1000mg，得到纯度99.0%的白色粉末状产品392mg，收率39.2%

制备条件4（上样量加大到1.5g）
流动相A：B=80:20
上样量：1500mg

1500mg上样量制备图谱

5.0-6.0min馏分检测图谱
序号保留时间名称浓度峰面积
───────────────────────
1 7.781 93.37 1095537
2 8.428 6.633 103520
───────────────────────
总计 100 1199057
结论：上样量体积太大，5min大部分样品直接洗下来。
总结：
上样量/mg
产品量/mg
纯度/%
得率/%
170
66
99.9
38.8
422
182
99.19
43.1
1000
392
99.0
39.2
1500
上样体积太大，大部分样品没保留

由上述实验结果对比得出：流动相选用20%甲醇，上样量1000mg条件更合理。

精
该帖子已被管理者-福利代言人设置为精华，下面是奖励记录：加20积分,加5声望

分
该帖子已被版主-福利代言人加10积分，加2经验;加分理由:支持原创帖！

相关话题

qianguiyun1

第1楼2015/10/11

应助达人

新手进来学习一下

0

dahua1981

第2楼2015/10/13

应助达人

谱图很漂亮

0

liuwei10987

第3楼2015/10/14

是吧，低波长下，我选择走等度，尤其是用甲醇做有机相。
dahua1981(dahua1981) 发表:谱图很漂亮

0

mengzhaocheng

第4楼2015/10/17

应助达人

放大实验蛮成功的，收率很理想

0

dahua1981

第5楼2015/10/19

应助达人

等度的很少用了
liuwei10987(liuwei10987) 发表: 是吧，低波长下，我选择走等度，尤其是用甲醇做有机相。

0

liuwei10987

第6楼2015/10/19

目前结果还算满意，还要继续放大。
mengzhaocheng(mengzhaocheng) 发表:放大实验蛮成功的，收率很理想

0

吕梁山

第7楼2015/10/21

我第一次见制备液相，和普通液相有什么区别吗？

0

liuwei10987

第8楼2015/10/21

制备液相，主要目的在于制备，这就要求上样量大，达到mg，g，甚至公斤级，这样就需要分离用的色谱柱也要换成内径10mm-200mm，同时还需要流量更大的液相泵（流速达到10-1000ml/min，还可以更大）。
分析液相的主要用途是分析定性定量，作为检测工具，一般流速不会高于1ml/min，色谱柱内径小于或等于4.6mm，上样量也是微克级。
吕梁山(shih20j07) 发表:我第一次见制备液相，和普通液相有什么区别吗？

0

吕梁山

第9楼2015/10/21

您的讲解非常仔细，这样的话天然有机分析的速度加快了好多啊
liuwei10987(liuwei10987) 发表: 制备液相，主要目的在于制备，这就要求上样量大，达到mg，g，甚至公斤级，这样就需要分离用的色谱柱也要换成内径10mm-200mm，同时还需要流量更大的液相泵（流速达到10-1000ml/min，还可以更大）。
分析液相的主要用途是分析定性定量，作为检测工具，一般流速不会高于1ml/min，色谱柱内径小于或等于4.6mm，上样量也是微克级。

0

symmacros

第10楼2015/11/22

应助达人

请问楼主这台仪器的最大上样量能达到多少mg?

0

查看更多

近期热榜

热门活动

猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐

品牌合作伙伴

日立科学仪器

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

日本电子株式会社

赛默飞世尔科技

马尔文帕纳科

上海仪电科仪

梅特勒托利多

布鲁克核磁

举报帖子

点赞用户

好友列表

加载中...

正在为您切换请稍后...