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你问我答『第一期』

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    2015/10/20
  • 私聊

液质联用(LCMS)



  • 保留因子(k)

    保留因子反应了色谱分离能力,等度洗脱的计算公式为:
    k=(tR-t0)/t0
    tR:保留时间
    t0:死时间
    对于一个稳定的方法,保留因子的范围为220意味着出峰时间晚,峰会过宽
    2死时间(t0
    死时间是物质不被柱子保留所运行的时间
    t0=Vm/F
    Vm= 0.5 L dc2
    Vm:死体积
    F:流速(ml/min)
    L: 柱子长度(cm)
    dc:柱子直径(cm)
    3三倍法则
    在等度洗脱中,有机相比例每变化10%,保留因子将变化三倍
    在方法开发的时候,可以非常有效的去预估保留时间
    4梯度陡度(Gs)
    梯度洗脱的保留因子与等度的计算方式不一样

    Gs:梯度陡度,
    F:流速(mg/l),
    ΔΦ:溶剂变化比例(5%-95% B,那么值就是90 )
    tG:梯度时间(min)
    Vm:柱体积(扣除了调料占据的空间)
    5理论塔板数(N)
    理论塔板数是一个反映柱效的关键参数,其计算过程如下:
    N=3000L/dp
    L: 柱子长度(cm)
    dp:柱子填料的径度(um)
    看完这个公式,你明白了为什么150mm*2.1mm,5um和50mm*2.1mm,1.8um的柱效是一样的吗?
    6柱子温度和保留时间
    柱温每变化1 °C ,保留会发生2%的变化,如果变化5°C,保留时间就会变化10%,所以切记安装完柱子后,合上柱温箱。
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  • ie4680180

    第1楼2015/10/21

    应助达人

    谢谢楼主无私分享。呵呵

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  • 化工小能手

    第3楼2015/10/28

    切记安装完柱子后,合上柱温箱。没想到影响会这么大

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  • 我爱吃芒果

    第4楼2015/12/18

    感谢楼主分享

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  • 我爱吃芒果

    第5楼2015/12/18

    你问我答。。。。

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  • hujiangtao

    第6楼2015/12/21

    应助达人

    简单明了 不错

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  • weiqing1983

    第7楼2015/12/28

    应助达人

    谢谢分享,赞一个!

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  • Clarissa3

    第8楼2016/01/06

    老师您好!
    我有个问题请教您:液质联用内标法定量一种已知 m/z的脂类物质,选用同位素标记的类似物作为内标,那么还有必要购买该物质的标准品吗?不知道标准品在此处的作用是什么。
    我目前的理解是同位素内标加入到样品当中后共同匀浆到提取,最后根据内标与目标检测无的峰面积之比等于两者浓度之比,依据这个来进行定量,不知道对不对?
    盼老师解答!

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