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安捷伦检定问题,求救

  • gabriel936
    2015/11/29
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 悬赏金额:10积分状态:未解决
  • 液相小白最近做液相检定,最小检测浓度确认做不出来,向各位大神求救。
    液相:安捷伦1200
    在线脱气机:已坏(亮红等)
    流动相:80%甲醇水
    色谱柱:C18,250mm,该柱子近一年来只用过3次,应该还算新。
    样品:10^-7g/ml萘甲醇溶液,10微升
    由于之前别人在这机子上做过高盐流动相的,所以先接二通,用了纯水,1.2ml/min流速,4条管路一起冲了一整晚,隔天来了接上柱子,用10%甲醇水冲了2小时,压力在10.5mpa(105bar)左右。再把流动相换成现配的80%甲醇水,柱压在11.5mpa(115bar)左右,进样,图谱如图。图中保留时间为11.352的应该是萘(进过大浓度的萘,可以确定),但是形状不成峰。翻查上一年做的检定,该项下该柱子的压力只有8.0mpa(80bar),怀疑柱子是否被水溶性差的盐堵住,用纯甲醇溶液,1.0ml/min流速,冲柱子,柱压6.0mpa(60bar),50min后再换80%甲醇水,压力回升到11.5(115bar)
    想问一下各位大神,柱压是否有问题?为何萘不成峰?重复配样过好几次,结果一样。由于在线脱气机坏了,样品浓度非常低,脱气不完全是否会影响峰型?到底是哪里出了问题,各位大神救救我!!
  • 该帖子已被版主-夏天的雪加5积分,加2经验;加分理由:鼓励发帖,发图奖励
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  • 安平

    第1楼2015/11/30

    应助达人

    建议换柱子,检测器能量不高

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  • 夏天的雪

    第2楼2015/11/30

    应助达人

    115bar的压力在此流动相略高,但是压力高应该不是主要因素。依据您的描述,在高浓度下出峰也不好色谱柱或者仪器都有可能出现问题,建议先更换一根色谱柱,将色谱柱排除后再去检查仪器

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  • lsyecspc

    第3楼2015/11/30

    应助达人

    应该不是柱子的问题,您是手动进样还是自动动进样,柱子不好也会出峰,只是出峰的形状会有差异,建议从样品、进样上找下原因。柱压高点一般不会影响出峰,只说明柱子可能有点堵,这根柱子用后是否用甲醇清洗灌封过。

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  • lsyecspc

    第4楼2015/11/30

    应助达人

    脱气机坏的机率比较小,看是否有漏液。

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  • 天涯尽头

    第5楼2015/11/30

    这个只能慢慢排查,确定样品没有问题,换根柱子或者换台仪器还用这根柱子试试,看看是柱子的问题还是仪器的问题。柱子的问题换根柱子。仪器的问题看流量够不够,氘灯能量。

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  • 夏天的雪

    第6楼2015/11/30

    应助达人

    可以给个大浓度的萘的色谱图,这个色谱图中待测物质的峰太小了

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  • 支点

    第7楼2015/12/01

    应助达人

    已经是很明显的信号的,峰型不好看是因为受基线噪音的影响,个人感觉还行。

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  • 淡如水

    第8楼2015/12/03

    先把脱气机修好了再说吧

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  • mxt07

    第9楼2015/12/03

    峰型差的问题
    从峰型图来看,整个基线都出现了上下波动,这也直接导致本来出现峰的位置由于波动的干扰,不能出现明显的峰。基线波动可能和脱气机出现问题有直接关系。可以尝试一下用超声过的缓冲液(超声可以脱气,建议超声后尽快使用),看看基线是否平稳。
    柱压高的问题:
    可能和柱子本身有很大关系。高盐和有机相直接接触容易堵塞管路。不过,通过帖子上的描述,即使出现堵塞情况,也不是你造成的。如果想确认的话,可以问一下最近使用该仪器的同事,有没有出现压力高的情况。
    另外,柱压高和峰型差之间没有必然关系。

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