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一例假阳性样品的判定

  • lhq84142248
    2015/12/04
  • 私聊

兽药/抗生素检测

  • 检测项目:三聚氰胺
    检测标准:NY/T1372-2007
    检测样品:配合饲料
    ◆检测步骤:
    1 配置标准品溶液
    1.1储备液的配制:称取对照品(含量99.5%)0.1005g,加入20%甲醇溶液定容于100ml量瓶中,该溶液容度为1mg/ml.
    1.2标准系列工作液 取适量储备液,配制成三聚氰胺浓度为1.0ug/ml、5.0 ug/ml、10.0 ug/ml、25.0 ug/ml、50.0 ug/ml。
    2.样品的前处理
    2.1称取2.5g被测样品,加入25.0三氯乙酸提取液,涡旋,震荡后离心取上清夜,备用
    2.2MCX萃取柱甲醇,水活化后,5ml上清夜过柱后,水、甲醇淋洗后,氨化甲醇洗脱后,50℃氮气吹干,加入20%甲醇溶液1ml,涡旋后,过滤、上
    前处理过程
    液相条件:色谱柱:C18 5um 4.6mm×50mm
    柱温:30℃
    流速:1.0ml/min
    检测波长:240nm
    流动相:A:庚烷磺酸钠2.02g和2.10g柠檬酸于1000ml量瓶中,用水溶解抽滤后,使用
    B:乙晴
    ◆结果分析
    1. 假阳性样品的判定:流动相A:B=90%:10%,上机检测,标准溶液在8.321min出现三聚氰胺样品峰,被检测的样品在8.404出锋,依据:NY/T1372-2007中3.5.4的规定,按照保留时间进行定性,试样与标准品保留时间的相对偏差不大于2%定性,即为阳性样品,该样品的保留时间与标准样品的保留时间相对偏差为0.4%,无法排除阳性。

    2、复检结果:样品重新提取,流动相重新配制,调节流动相比例A:B=92%:8%,上机检测,标准出现三聚氰胺样品出峰时间13.371min.被测样品在14.143min出现样品峰,依据:NY/T1372-2007中3.5.4的规定,按照保留时间进行定性,仍无法排除阳性的可能。
    用疑似阳性样品的基质,配制三聚氰胺浓度为5.0 ug/ml的溶液,上机测定后发现被测样品13.371min出现一个样品峰,峰面积与添加量相吻合,从而排除可能存在阳性样品
    .
    ◆小结:查阅一些资料得知,液相相对液质而言,定性较难,定量较准,因为保留时间的误差,很难完全排除假阳性的存在,一旦定性,定量还是比较准确的,这就 要求 我们检测人员提高检测水平,积累一些经验,这样,当我们面对复杂的样品时,才能客观的下定结论,如果一个经验丰富的临床医生,给一个病症得出一个客观的治疗方案。
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  • lhq84142248

    第1楼2015/12/04

    这周刚做的试验,总结出来和各位分享!

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  • 骏马奔腾

    第2楼2015/12/29

    应助达人

    图文并茂的一篇原创作品,很给力的作品

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  • 栀子花开

    第3楼2015/12/29

    应助达人

    确实如此,液相定性难度较大,仅仅凭保留时间是很难定性的,可以改变流动相看标准品和待检样品是否连续一致,还可以在待检样品中加入标准品看是否出现不同的峰,但即使这样也只能大致定性

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  • 被风吹过的夏天

    第4楼2016/01/08

    应助达人

    假阳性是实验室常见现象,很多人不够重视,文章很好

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  • hujiangtao

    第5楼2016/01/13

    应助达人

    标准添加法也是判断假阳性的一种

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  • lhq84142248

    第6楼2016/01/13

    经常做实验的,很难保证不出现假阳性的情况

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  • LGT0102

    第7楼2016/03/09

    老师,你这个保留时间偏差为0、4%,怎么计算的?不太明白

    lhq84142248(lhq84142248)发表:这周刚做的试验,总结出来和各位分享!

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  • lhq84142248

    第8楼2016/03/22

    就是两个保留时间的相对偏差啊!两个数值的平均数与某一个数值的差值与平均值的比值的百分数!

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  • 无为

    第9楼2016/05/21

    你的这个饲料的谱图杂峰还真是少啊,我们做过的饲料尽管净化也会有很多杂峰,如果是牛奶,那个比较高的杂峰是在目标峰前面,面对这样问题,我们通常会上质谱来定性,色谱确实存在假阳性的可能,如果真把他看做三聚氰胺的峰,如果低于检出限就视而不见啊、

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  • whomeyou

    第10楼2016/06/22

    13.325min处的峰是谁的峰?还有,用疑似阳性样品基质配置标准液,是向样品萃取液中加入标准液还是在样品前处理之前就加入标准液?这两种加法会对结果产生影响吗?刚开始接触兽残实验,还请老师多指教。谢谢

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