此物如此奇葩！

各位专家，我要测四氢姜黄素，流动相：乙腈：1%甲酸（45：55），280nm。对照品色谱如图，有两个峰，两峰之间基线升高，估计是β二酮和烯醇式互变异构。反相条件基本都是这模样，包括文献、对照品供应商的标准图谱都是。峰形跟样品的溶剂有关系，此图是甲醇为溶剂；溶剂中含水时，5min的峰面积会变大，后面11分钟的变小。由于薄层色谱条件三氯甲烷-甲醇-甲酸（96：4：0.7）下，只有一个点，所以我觉得正相色谱条件可能可以，但试了几种正相柱，正己烷-异丙醇流动相，峰形都很差，拖尾。
请问有什么好的解决办法？

问问合成这个东西在酸性或者碱性条件下更容易发生烯醇式互变。如果是酸性，就在反相中试试中性流动相，别加甲酸，并且尽量用流动相做溶剂。
在我做过的项目中，也有过类似的情况，存在疑似烯醇式互变情况，我用AGIELNT SB-C18柱似乎峰型比较好。

酮式-烯醇互变在酸碱条件下都可以进行。这个物质是酸性的，流动相只能是酸性或中性，中性流动相乙腈-水也试过，跟加酸几乎没啥区别。

你做过乙腈水么，我想应该也可以

agilent SB-C18是比较适合酸性物质的，我觉得还是要从色谱柱方面找找原因，是否封尾和键合相，反相柱样液不宜用纯有机相溶剂，适当加一点水相，至于互变异构不太了解，持续关注。

哈哈，这个柱子是用过的。反相条件基本以乙腈-水。感觉只要沾水就会互变哦。谢谢关注！

应助达人

如果不知道哪个条件下更稳定，建议做一个要不同PH下的稳定性试验，即固定色谱条件，样品浓度一致，每隔一个pH做一个样品。
另外问一下研究人员，这个东西怎么保证样品的纯度，还是二酮式与烯醇式的功效一样？如果不一样那生产的时候肯定要用某一方法使之保持其中一个结构

pH值2~7.8都做过，随pH值升高，第一个峰减小，第二个峰增大。两峰总面积在pH2~7有增大的趋势。至于 哪个结构药效更好的确还没研究过，感觉有点难度，呵呵

应助达人

以下为个人猜测，运用同离子效应原理，把流动中的乙腈改为甲醇，是不是可以抑制烯醇式的产生？