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请教大家:样品重复性不好的原因有哪些?

液相色谱(LC)

  • 中药 车前子的含量测定, 5针对照品 RSD 很好,2个样品的分离度和塔板很好,但是2个样品的重复性不好,但出现了第一针面积比第二针 大10%的现象。
    请教大家有哪些因素导致这样的结果?
    1. 洗针液是 纯甲醇
    2.每次进针后都洗3次
    3.该实验是梯度,每次进针后平衡20分钟是否足够
    4.两个样品都存在前一针比后一针面积大的现象
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  • 武灵

    第1楼2016/03/24

    平衡20分钟我任务是足够了的,还有不知道你的流动相中是否含有盐,用的洗针液是纯甲醇。
    两个样品都存在前一针比后一针面积大?

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  • cai100

    第2楼2016/03/24

    以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇为流动相A,以0.5%醋酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为254mn。理论板数按京尼平苷酸峰计算应不低于3000。

    时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%)

    0~1 5 95

    1~40 5→60 95→40

    40~50 5 95
    对照品溶液的制备 取京尼平苷酸对照品、毛蕊花糖苷对照品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加60%甲醇制成每1ml各含0.1mg的混合溶液,即得。

    供试品溶液的制备 取本品粉末(过二号筛)约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入60%甲醇50ml,称定重量,加热回流2小时,放冷,再称定重量,用60%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

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  • inhuman

    第3楼2016/03/24

    有没有继续多进几次样品,看是否有规律。

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  • 夏天的雪

    第4楼2016/03/25

    应助达人

    第一针会不会是对照品的残留,在进第一针之前进一个空白试试

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