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荧光检测器测定时待测组分出倒峰

  • 夏天的雪
    2016/03/29
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 最近在测定某一组分时待测组分出现倒峰,测定的液相条件为流动相:100%乙腈;荧光检测器;标准品用乙腈配制,测定其它组分时均正常,唯独此物质出现了倒峰;色谱图为标准溶液色谱图

    出现如此倒峰的原因有哪些,如何解决。
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  • 夏天的雪

    第1楼2016/03/29

    应助达人

    液相中可能产生倒峰的原因有:
    、溶剂峰,用流动相定容样品;
    2、样品中某物质的吸收值比溶剂背景吸收小;
    3、低波长下会出现倒峰;
    4、如用紫外检测器,有没有加参比波长?如果有,去掉参比波长或另选合适的;
    5、如用紫外检测器,流量池里是否有气泡产生?
    解决方法:1.抽滤或超声去除流动相里的气泡;
    2、检查在线脱气机(如果有的话);
    3、调节背压。
    6、流动相是否在该波长(紫外检测器)有较大的背景?
    解决方法:1、检查你用的溶剂的等级(应为色谱纯);
    2、检查色谱条件的合理性。
    7、进样阀切换造成的波动;
    8、有负吸收物质;
    9、氘灯老化、流通管道或池不通畅、样品和流动相中含有小颗粒;
    10、水分引起的。

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  • 有水有渝

    第2楼2016/03/29

    应助达人

    激发波长与检测波长设置是否正确,方法是首次开展,还是多次检测的成熟方法?

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  • 夏天的雪

    第3楼2016/03/30

    应助达人

    首次开展的方法,激发和检测波长通过扫描确定

    有水有渝(xky0230699) 发表:激发波长与检测波长设置是否正确,方法是首次开展,还是多次检测的成熟方法?

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  • seannoy

    第5楼2016/04/18

    流动相又是啥 是不是目标物的激发发射吸收小于流动相的了

    夏天的雪(bingwang228) 发表: 首次开展的方法,激发和检测波长通过扫描确定

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  • 夏天的雪

    第6楼2016/04/18

    应助达人

    流动相是乙腈和水,可能是这个原因,与波长选择有关

    seannoy(v2723283) 发表: 流动相又是啥 是不是目标物的激发发射吸收小于流动相的了

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  • seannoy

    第7楼2016/04/18

    那就要重新选择了 是不是应该用流动相配标 再重新扫一遍激发发射 不过什么波长流动相会有强信号

    夏天的雪(bingwang228) 发表: 流动相是乙腈和水,可能是这个原因,与波长选择有关

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  • 夏天的雪

    第8楼2016/04/18

    应助达人

    标样是用流动相配的,试过更换激发和发射波长,更改后出正峰,但是响应值很低

    seannoy(v2723283) 发表: 那就要重新选择了 是不是应该用流动相配标 再重新扫一遍激发发射 不过什么波长流动相会有强信号

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  • seannoy

    第9楼2016/04/18

    那就说明在这一激发发射上 流动相还是有比较高的背景信号

    夏天的雪(bingwang228) 发表: 标样是用流动相配的,试过更换激发和发射波长,更改后出正峰,但是响应值很低

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  • 支点

    第10楼2016/04/20

    应助达人

    楼主总结的主要是紫外检测器的情况,但荧光检测器的原理、结构与紫外是不同的,百度了一个荧光检测器的示意图。

    首先按照理论和结构上看,负峰是无法理解的。然后看楼主的基线很高,也看了楼主的另外一个帖子,是否有可能是由于激发波长和发射波长太近,被溶剂散射或是管路漫反射造成的基线信号,然后由被测物质吸收相应波长而没有发射造成的负峰。以上是个人对这张谱图的一点理解,建议楼主更换一下检测条件试试。

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