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峰前沿，怎么都消除不了，求大神们帮忙。

moshanghuakai

2016/06/02

液相色谱（LC）

hilic色谱柱，分析，GMP, ATP和GDP。ATP和GDP不容易分开，所以梯度设计变化较小。具体为：A相 10mM KH2PO4, 0.02% 三乙胺，pH 约为6.8. B相 85%ACN/15%A相。梯度为：
0min, 100%B;
3mim, 10%A+90B%;
10min, 10%A+90B%;
13min, 15%+85%B；
15min,15%+85%B;
17min, 50%A+50%B;
19min; 50%A+50%B.
19.1mim; 100%B.
结果如图，分倒是分开了，但峰前沿很明显，开始以为是溶解样品的溶剂问题，用流动相溶解还是有前沿，柱效也测了，没问题。所以想问问大神们这是怎么回事儿，我该怎么做。
是样品在流动相中溶解的不好造成的吗？还是怎么回事啊

分
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moshanghuakai

第1楼2016/06/02

怎么没人理我啊，高人都在哪里啊

0

有水有渝

第2楼2016/06/02

应助达人

方法是标准方法吗？样品的纯度高吗，有没有干扰成分没有分开的可能

0

moshanghuakai

第3楼2016/06/02

方法是自己摸索的方法，没有标准方法啊。样品纯度是95-98这样子吧，不至于有这么多的杂质啊，感觉还是方法的问题啊

0

武灵

第4楼2016/06/02

样品纯度都是95-98？标准品呢？
moshanghuakai(moshanghuakai) 发表:方法是自己摸索的方法，没有标准方法啊。样品纯度是95-98这样子吧，不至于有这么多的杂质啊，感觉还是方法的问题啊

0

武灵

第5楼2016/06/02

弱弱的请教下，ATP是不是腺嘌呤核苷三磷酸？

0

moshanghuakai

第6楼2016/06/02

是的，就是这个腺嘌呤核苷三磷酸
武灵(zhonghuashendun) 发表:弱弱的请教下，ATP是不是腺嘌呤核苷三磷酸？

0

moshanghuakai

第7楼2016/06/02

就用纯度95-98的做标准品了
武灵(zhonghuashendun) 发表: 样品纯度都是95-98？标准品呢？

0

moshanghuakai

第8楼2016/06/02

另外，用初始流动相溶解样品，假设我的初始流动相是90%乙腈/10% 10mM KH2PO4，0.02%三乙胺, 样品溶解溶剂是90%已经/10%水，这算是起始流动相溶解样品吗

0

moshanghuakai

第9楼2016/06/02

感觉，现在仪器信息网，冷清多了，没多少人上的样子啊，都是版主在回复啊

0

有水有渝

第10楼2016/06/03

应助达人

把流动相pH调节至酸性试试，如2-3之间，

0

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