酚试剂分光光度法测甲醛，标准曲线，吸光度上不去！

后来一次标液里加吸收液的斜率有0.2978这样，

有前辈指点一下吗？我一直认为可能是酚试剂的原因。要不要标液自己配制做做看？

质控也不准，明显偏低！！！！买来的标液我都是用水稀释的，盲样也是用纯水稀释的？难道都要吸收液稀释吗？

空白是0.029这样，上面说错了

对于同一个浓度的甲醛标准溶液,反应时的温度和时间对反应有显著影响。温度越低,显色完全所需要的时间越长。在10℃时,显色完全需要40min;15℃时,需要30min;20℃时,需要25min;而在40℃时,则10min就显色彻底。故显色时所需要的最佳温度和时间是40℃时(可采用水浴锅以保持水温恒定)显色10min。

硫酸铁铵的量不宜过多,否则空白管吸光度值高,影响比色,以加1%硫酸铁铵0.4ml为好

显色剂pH值控制在4为好,此时吸光度达到最大且最稳定。

甲醛标准曲线绘制时，用于配置甲醛标准色列管的甲醛标准溶液中必须加入酚试剂原液放置30min后待甲醛与酚试剂反应完全后再移取溶液进行显色实验，否则溶液不显色。酚试剂原液最好现用现配，如果放置时间过长会引起实验误差。

应助达人

酚试剂原液不能过久存放，放冰箱最多三天。否则结果肯定要受影响。显色的温度越高，吸光度越高。楼主可以从这两方面去考虑。