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样品预处理-没TA真不行

happytiankong1

2016/08/04

离心法是样品预处理常用之法，你一定会经常用到！此法能使比重不同的物质分离，是最常用的生化分离方法。随着生命科学技术的发展，离心分离技术已成为生物化学与分子生物学中不可缺少的分离技术手段。离心分离只需较短的时间即能获得大于重力沉降的效果，似不似很重要腻，且看下文。。。
离心机常见分离样品
1、悬浮液
颗粒的大小和含量对悬浮液的物理性质及分离性能均产生较大的影响。
2、胶体
3、表面活性剂
分为离子型和非离子型两大类，离子型中分阴离子、阳离子和两性型三类。
4、发酵液：生化实验中常用
5、乳浊液
　天然的乳浊液有牛乳、橡胶乳；人工的高速切削用润滑冷却液、油田钻井用油基泥浆、农药、杀虫剂等，均是工业生产中应用的乳浊液实例。
操作项目
１.平衡离心管。
２. 操作离心机。
３.离心机及转子的保养。
使用步骤
１.如使用低温离心机，设定使用温度(通常为４℃)后；关上舱门，使离心舱的温度下降，预冷时间要充足。

２.将样本装入适当的离心管，平衡重量，盖上离心管盖子并旋紧。
◆ 注意离心管只装七成满，虽然加有盖子，但也可能因离心力太强而外泄。
◆ 放在碎冰上的离心管，注意平衡时，要把碎冰的液体擦拭干净。
◆ 单个的离心管要用另一只装有清水的离心管平衡。
3.把平衡好的离心管对称地放入转子中，盖上转子的盖子，注意有无旋紧。
◆若转子的盖子没旋紧，离心时会掉出来，造成很大的伤害！
◆低温离心机转子的盖子旋紧前，要注意是否放正，否则离心时机器会损坏，离心后盖子难以旋开。
4.关上离心机舱门，在仪表板上调好所要的转速与时间，例如，12000rpm/min。
◆注意所用转速绝对不能超过转子的限定，最高转速通常写在转子上面，例如，TGL-20m的最高转速为20000rpm，但若离心机太老旧，必须往下调降。
◆转速与时间设定尽量不要太高，例如，能使用7000rpm者就不要用8000rpm。一般实验12000rpm就可以了。
５.确定所有步骤无误后，按start钮开动，离心机渐渐加速，此时要密切监控。
◆ 按start的按钮时，按住时间不能太短，请持续按约一秒钟后才松开。
◆ 开始加速的时候最危险，若发现声音不对，或产生大震动，请立刻按stop
６.等到离心达到所要的转速后，确定一切正常才可离去。
７.完成离心时，要等转子完全静止后，才能打开舱门；请尽快取出离心管，先观察离心管是否完全，以及沉淀的位置，尽速把上清倒出，小心不要把沉淀弄混浊。
◆倾倒上清要很小心，以免把沉淀一起倒出来；若不慎混在一起，就要重来一次。
◆若离心管有漏，要找出原因，并且立刻清理转子或离心舱。
８.低温离心时，在两次离心之间的空档，盖上舱门，勿让热空气流入离心舱。
９.全部使用完毕后，清理转子，离心机内壁，及桌面。
使用时要注意啦！！！
使用离心机首重的当然是安全啦！离心力失控可能造成很大的破坏。因此要注意，注意，再注意！离心管是否平衡，转速是否超过设置，转子是否有腐蚀。。。。。。
1．离心管一定要平衡好，放入转子时也要注意位置平衡！绝对不要超过离心机或转子的最高限转速。
2．一定要在达到预设转速后，才能离开离心机；若有任何异状，要立刻停机。
3．通常听声音即可得知离心状况是否正常，也可注意离心机的震动情形。
4．使用硫酸铵等高盐溶液样本后，一定要把转子洗干净，也要清理离心舱。使用低温离心机后，要擦干转子和离心机内壁。
离心分离方法，哪个更强？
1、差速离心分离：
优点：操作最简便，使用最广泛。
缺点：差速离心的分辨率不高，沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开，常用于其他分离手段之前的粗制品提取。
2、区带离心：
根据离心操作条件不同，可分为差速区带离心和平衡区带离心。
差速区带离心法：
此法是一种不完全的沉降，沉降受物质本身大小的影响较大，一般是应用在物质大小相异而密度相同的情况。常用的梯度液有Ficoll、Percoll及蔗糖。
平衡区带离心（等密度离心法）：
此法一般应用于物质大小相近，密度差异较大时。常用的梯度液是CsCl。

常用离心分离设备，你造吗？
实验室用离心机：离心管式转子离心机为主。
生化用离心机一般为冷却式，可在低温下操作，称为冷冻离心机。
工业离心分离设备常用的有管式和碟片式两大类。
1、管式离心机：
应用：
A、液-液分离(连续式)，
B、低固体含量(<1%)的固-液分离(间歇式)。
主要技术指标：
A、离心管直径40-150mm，长径比4-8；
B、离心强度8000-15000g；
C、处理能力100-400 L/h；
D、适应的颗粒直径0.01-100mm，
固液密度差大于0.01g/cm3，
固体含量小于1%
优点：
A、结构简单，价廉，
B、分离效果好，分离因数高8000-15000g
缺点：
A、处理能力有限，间歇操作；
B、低固体含量的悬浮液(<1%)
2、碟式离心机：
化学、制药和生化工业应用最广泛
特点：
A、10～100个锥顶角为60～100°的锥形碟片；
B、碟片距离很短0.5～2.5mm，沉降距离极短，分离效果高；
C、碟片多，沉降面积大，增加分离效果；
D、抗对流效果高。
分类：
Ａ、人工排渣式;
Ｂ、喷嘴排渣式;
C、活塞排渣式。

常见离心机维护与保养需注意
1. 离心机的维护：
使用水或柔和的清洁剂清洗转子室及转子，不应使用碱性溶液或对材料有磨蚀的溶剂。
使用抹布或镊子移出转子室内的赃物碎片。
离心机未使用时打开顶盖，保持转子室干燥，以避免电机轴承磨损。
离心有毒、放射性、污染样品时必须有特殊的安全保护措施。
每次出料后应及时发现各部连接处的松动现象加以紧固，检查接地转鼓等各部件的完好情况。
离心机必须有专人负责操作，不得随意增加装料限量，操作时注意方向应正确。
不得随意增加离心机的转速，在使用6个月后，必须进行全面保修一次，对转固部位清洗，并加注润滑油。
本机保持完好清洁，操作环境打扫清洁。
2.离心机附件的维护
如有离心管显示颜色变化、变形、泄露等必须停止使用。
对离心管进行高温高压消毒时不要拧上管帽，避免管子变形，每种离心管消毒可耐温度见用户手册此节列表。
离心机尽量与其它用电设备保持一定距离，并有良好的接地措施，且进行定期检查。
离心机和转子不得用高强度UV辐射或长时间受热。清洗时应用中性洗涤剂。
如需要，转子可更换。重新安装后，上紧转头螺钉。
3.转头销钉
转头销钉需经常用润滑油润滑，确保离心机运转平稳。4
4.冷凝器的维护
冷凝器用来冷却冷冻剂，安装于离心机后部，采用风冷方式。
冷凝器应定期清理灰尘，以免传热受阻。可用压缩空气吹洗此处。
5.转子腔体及附件的灭菌和消毒
所有常规的消毒剂都可使用。由于离心机及附件由不同材料制成，所以必须考虑到消毒剂的相容性。
6.操作检查
操作者应确保离心机重要部件完好，主要指：
电机悬挂稳定
转轴无偏离
转子和附件没有腐蚀
螺钉连接紧固。
此外，地线必须定期检查～
来源：实验与分析

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雾非雾

第1楼2016/08/05

应助达人

离心分离是比较易于实现的液固分离的好办法，有些液液分离也可以用到。

0

happytiankong1

第2楼2016/08/05

离心分离作为粗分离还是很有用的，而且在样品前处理中，离心机是必备仪器
雾非雾(mcds) 发表:离心分离是比较易于实现的液固分离的好办法，有些液液分离也可以用到。

0

wsy18

第3楼2016/08/05

我们在环保治理中常常用它解决固液的分离。

0

qianguiyun1

第4楼2016/08/07

应助达人

如果是互溶的，离心机是没有办法的

0

荷花仙子

第5楼2016/08/07

前处理是测试的关键前提

0

Flynnchen

第6楼2016/08/07

详细的描述。不错！

0

WUYUWUQIU

第7楼2016/08/08

应助达人

离心分离前处理不可缺少的

0

吕梁山

第8楼2016/08/11

离心机非常实用
雾非雾(mcds) 发表:离心分离是比较易于实现的液固分离的好办法，有些液液分离也可以用到。

0

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