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多糖与蛋白质混合物的GPC分离与分析应用实例

厂商论坛

  • 近期,我们为国内某客户做了两个GPC样品分析,挺有意思的,我发到论坛里供大家参考。
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  • abuhaier

    第1楼2016/10/24

    这2个样品,分子量不大,用GPC就可以很好地分离了,因此没有用场流仪来做。仪器配置包含了PN3621型21角度激光散射检测器、PN3310型四毛细管粘度检测器、紫外检测器、示差折光检测器、带半导体制冷的柱温箱、自动进样器。

    数据结果,包含了:绝对分子量、特性粘度、均方旋转体积与半径、流体力学体积与半径、浓度-含量、以及mark-houwink方程里的常数等等。从前后三个峰的分子量、特性粘度、体积与半径的数据,可以判断出来:第1、3两个峰,是多糖,因为其体积较大、粘度较大、无紫外吸收;而第2个峰,显然是蛋白质,因为其体积较小、粘度较小、有紫外吸收。

    此外,客户自己用不带MALS和IV的传统GPC分析这俩样品时,没有看到第三个峰,但是用多检测器GPC,则可以清楚地看到第三个峰,也说明了MALS和IV这俩定性检测器所具有的监控分离过程的功能,是非常强大可靠的!其实,在用传统GPC分析这俩样品时,第三个峰也是有的,只是很矮的、几乎看不出来,特别是又有前两个峰的时候,就更看不出来了。但是,MALS和IV的信号,不仅仅与样品组分的浓度有关,还与样品组分的绝对分子量、特性粘度有关,因此,尽管第3个峰浓度很低,但是其组分的分子量和特性粘度并不低,因此就很容易地被MALS和IV捕捉到了信号了。

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  • abuhaier

    第2楼2016/10/24

    在这个分析中,使用的是postnova公司自己的柱子,型号是:NovaGel 400/300/250,共计三根柱子。在进样分析前,用双指标标样对MALS和IV都进行了准确标定。

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  • abuhaier

    第3楼2016/10/27

    大家好!为了让大家更好地了解这个测试,我把测试报告删除了单位信息、上传到这里了,大家可以下载看一看,其中的测试结果列表中可以清楚看到特性粘度、体积等方面的数据,对样品的判断就是以此为基础的,可以看到:多糖与蛋白质的粘度、体积差别很大。

    凡事采购了我们的仪器的用户,不论买的是场流仪FFF,还是GPC,都可以由我们的应用工程师来为客户开发分析方法,以便更快地做出好的、正确的分析结果。像这个多糖应用,就可以在买了仪器之后,把这个色谱方法直接发给客户,客户自己按照这个方法做(在自己的仪器的软件上打开方法、另存),就可以得到好的分析数据了。

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