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求助 糖基色谱柱中鬼峰的清洗方法

  • RachelSong
    2017/06/13
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 咱们实验室才买了一个伯乐的糖柱 87p, 2W多的那款测纤维素糖的,配着保护柱用了3个月,现在出现了鬼峰。鬼峰出现的地方在13-16.5分钟之间,刚刚好我的木糖和阿拉伯糖的样品出峰时间也在这,所以很糟糕。

    按照说明说上30%乙腈水0.1ml/min倒冲了一周了,鬼峰面积减小了,可鬼峰还是有,求大神提供彻底的解决方法。说实话,我实在不清楚为什么我测糖标准品也能把柱子给污染了。也不知道是不是保护柱的问题。

    附上空白试剂纯水的色谱图。附上说明:肯定不是自动进样器污染,因为岛津的工程师已经帮我检查过了;肯定不是流动相污染,哇哈哈脱气后,每天更换;肯定不是样品污染,样品每天都是新配的。

    或者如果送修的话,请大家谁能告诉我送修的单位?千万别说再买一根,2W多的柱子,我们实验室是要让我赔的。
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  • chemchao

    第1楼2017/06/13

    鬼峰和样品峰出现在差不多的位置,还可能是残留问题。不接柱子走是否还有鬼峰,还有检测器的问题有没有排除掉??冲洗之后鬼峰的保留时间和峰面积变化如何??

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  • RachelSong

    第2楼2017/06/13

    chemchao(v3137128) 发表:鬼峰和样品峰出现在差不多的位置,还可能是残留问题。不接柱子走是否还有鬼峰,还有检测器的问题有没有排除掉??冲洗之后鬼峰的保留时间和峰面积变化如何??
    应该不是样品峰和残留,不接柱子势没有鬼峰的,检测器的问题也排除了,换的C18柱子检测过,冲洗之后,鬼峰停留时间没变,峰面积变小了,可冲洗了30个柱体积后,峰面积不会持续变小,所以现在头疼,怎么把现在的峰给去除掉。求大神帮忙给意见啊。我不想赔实验室一根柱子啊,2W多呢,这个

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  • 皮皮有话说

    第3楼2017/06/13

    换的C18柱子检测过,冲洗之后,鬼峰停留时间没变,峰面积变小了,可冲洗了30个柱体积后,峰面积不会持续变小,这句话没有弄懂是什么意思。是仪器用C18检测别的东西然后再换回来糖柱测糖还有鬼峰的意思吗?

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  • chemchao

    第4楼2017/06/13

    乙腈比例调大一些,或者换流动相冲洗,也许乙腈和水冲洗不干净,查看柱子使用说明看在适用的溶剂流动相里多试几个流动相冲洗。

    RachelSong(v3241345) 发表:

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  • 夏天的雪

    第5楼2017/06/14

    应助达人

    分别断开保护柱和色谱柱试试,先找到鬼峰的来源,然后再咨询一下色谱柱厂家用什么流动相冲洗比较好,是否可以提高冲洗液乙腈的含量

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  • 有水有渝

    第6楼2017/06/14

    应助达人

    前面3个月都没有问题,说明早期的系统与样品都没有问题,现在样品每天都配制不等于样品没有问题,也有可能样品变质了,还有就是色谱柱或系统污染了,污染也跟洗衣服一样,从很脏洗到不怎么脏很容易,但要洗到完全跟新的一样很难。现在就快的办法就是把保护柱换了看看结果如果。

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  • RachelSong

    第7楼2017/06/14

    我现在把保护柱给拆了,只接色谱柱进行冲洗,30%乙腈水冲了一周后,鬼峰的峰面积减小,但是还是存在,持续冲洗后,现在峰面积已经不减小了。现在我们实验室老师已经把柱子说送修了,但愿柱子不会报废。
    所有的流动相,还有乙腈水,样品都是新配制的,变质的可能性不存在,我们现在问题就是色谱柱给污染了。
    伯乐的工程师让我梯度洗脱,从5%-30%冲4个小时,可我是菜鸟一个,实在不知道怎么设置梯度洗脱。RID检测器都是等度洗脱的。

    有水有渝(xky0230699) 发表:前面3个月都没有问题,说明早期的系统与样品都没有问题,现在样品每天都配制不等于样品没有问题,也有可能样品变质了,还有就是色谱柱或系统污染了,污染也跟洗衣服一样,从很脏洗到不怎么脏很容易,但要洗到完全跟新的一样很难。现在就快的办法就是把保护柱换了看看结果如果。

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  • 有水有渝

    第8楼2017/06/15

    应助达人

    RID检测器可以梯度清洗系统,但不能梯度检测样品。梯度不梯度运行跟泵有关,跟检测器无关

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  • RachelSong

    第9楼2017/06/15

    刚刚电话岛津问怎么设置梯度洗脱,结果客服直接给我们报修,说要派工程师来,晕死的,要是还是上次那个工程师,估计要骂死我了.
    不过昨晚上我们实验室的小老师说,固定在某一时间段出的鬼峰,大概应该是在检测器那里的,杂质在柱子上的不会固定在某一时间点出鬼峰。我都快给这些‘’专家意见‘’搞疯了

    有水有渝(xky0230699) 发表:RID检测器可以梯度清洗系统,但不能梯度检测样品。梯度不梯度运行跟泵有关,跟检测器无关

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  • 有水有渝

    第10楼2017/06/16

    应助达人

    等度下固定出鬼峰的估计来自样品或溶剂,你鬼峰的保留时间也不是固定的,每针的采集时间是多少,

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