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卫生纸中细菌菌落总数的测量不确定度评定

其他消费品检测

  • 卫生纸中细菌菌落总数的测量不确定度评定

    贾 亮

    山西省产品质量监督检验研究院山西太原030012



    1 引言

    测量不确定度是与测量结果相关联的参数,用以表征合理赋予被测量值的分散性。本文适用于卫生纸中细菌菌落总数的测量不确定度的评定,这里的卫生纸是采用标准GB 20810-2006《卫生纸(含卫生纸原纸)》生产的产品。

    2 测量参数概述

    主要仪器:电子天平(220g)、量筒(250mL)、移液器(1mL)、恒温培养箱。

    参数:细菌菌落总数。

    3 原理及方法

    依据GB 20810-2006《卫生纸(含卫生纸原纸)》中附录A.3.1细菌菌落总数的检测进行卫生纸中的细菌菌落总数的检验。在超静工作台上用无菌方法开启4个小包装,从中称量样品10g,剪碎后加入到200mL灭菌生理盐水中,充分混匀,得到一个生理盐水样液。待上述样液自然沉降后取上清液做菌落计数。共接种5个平皿,每个平皿中加入1mL样液,然后用冷却至45℃左右熔化的营养琼脂20mL,倒入平皿中,充分混匀。待琼脂凝固后翻转平皿,置36℃培养温箱内培养48 h。然后计算平皿上的细菌菌落数目

    5块营养琼脂培养基平板上的细菌菌落总数A,稀释度为,卫生纸中的细菌菌落总数X按下式计算:

    X=A

    式中:X----细菌菌落总数,单位为CFU/g;

    A----5块营养琼脂培养基平板上的细菌菌落总数, 单位为CFU/g;

    ----稀释度,此处稀释度为20。

    4 结果与讨论

    4.1测量不确定度的来源

    依据前述卫生纸中细菌菌落总数的检测原理及测量模型,结合检测经验,分析卫生纸中细菌菌落总数的测量不确定度来源主要有:

    4.1.1由卫生纸中细菌菌落总数测量的重复性引入的不确定度。

    4.1.2由天平称量时引入的不确定度。

    4.1.3由量筒量取生理盐水时引入的不确定度。

    4.1.4由移液器移取样液时引入的不确定度。

    以上不确定度来源,第一种来源可以用A类不确定度评定,后三种来源可用B类不确定度评定。

    4.2测量不确定度评定

    4.2.1 A类不确定度评定

    卫生纸在检测细菌菌落总数时,每个试样需要检测5份,计算其平均值后报出细菌菌落总数。本次报告中,由同一人员对15个样品进行重复性检测。用菌落总数的平均值直接计算标准偏差,因其数据的发散性较大,计算出的样本标准差会很大,不符合正态分布规律,所以对检验结果取其对数,然后计算出样本检验结果对数值的均值和重复性标准偏差,其数据处理过程见下表1:

    检验结果对数值平均值: =2.74

    检验结果对数值的重复性标准偏差为:

    S= =0.058

    检验结果对数值平均值的重复性标准偏差为:

    S‘= S/ =0.0151


    表1: 卫生纸中细菌菌落总数检测结果

    序号

    A1

    A2

    A3

    A4

    A5

    A

    X

    -2

    1

    32

    23

    34

    19

    18

    126

    504

    2.70

    0.0016

    2

    29

    24

    22

    21

    23

    120

    480

    2.68

    0.0036

    3

    19

    36

    30

    34

    16

    135

    540

    2.73

    0.0001

    4

    32

    23

    17

    26

    45

    143

    572

    2.76

    0.0004

    5

    20

    26

    45

    45

    17

    153

    612

    2.79

    0.0025

    6

    16

    34

    36

    40

    26

    152

    608

    2.78

    0.0016

    7

    18

    35

    33

    19

    25

    130

    520

    2.72

    0.0004

    8

    16

    36

    37

    32

    29

    150

    600

    2.78

    0.0016

    9

    42

    16

    18

    22

    23

    121

    484

    2.68

    0.0036

    10

    16

    27

    25

    46

    25

    139

    556

    2.75

    0.0001

    11

    19

    23

    22

    53

    36

    153

    612

    2.79

    0.0025

    12

    26

    30

    23

    36

    35

    150

    600

    2.78

    0.0016

    13

    14

    16

    30

    10

    33

    103

    412

    2.61

    0.0169

    14

    16

    17

    34

    19

    40

    126

    504

    2.70

    0.0016

    15

    23

    19

    35

    16

    17

    110

    440

    2.64

    0.0100



    4.2.2 B类不确定度评定

    样品初始液制备过程时,使用220g的电子天平称取10g的样品,加入到用250mL量筒量取的200mL灭菌生理盐水中。根据JJG 1036-2008《电子天平》和JJG196-2006《常用玻璃量器》,220g电子天平最大允许误差为0.0001g, 250mL量筒的容量允许差为1.0mL,按均匀分布处理,其标准不确定度分别为 0.0001/=0.00058g、1.0/=0.58mL。初始液向平皿转移过程中,使用1mL移液器量取1mL初始液至平皿中,根据JJG646-2006《移液器》其容量允许差分别为0.015mL,按均匀分布处理,其标准不确定度分别为0.015/=0.0087mL。

    稀释过程中相对标准不确定度:

    uB=1/2 =0.0100

    4.3 合成不确定度

    合成相对标准不确定度:u cr= [0.01512+ 0.01002 ]1/2=0.10

    合成标准不确定度:u C=2.74×0.10= 0.27

    4.4测量不确定度报告

    为保证置信概率达95%,取包含因子k=2,扩展不确定度为:U=kuC=2×0.27=0.54。依据RB/T151-2016《食品微生物定量检测的测量不确定度评估指南》规定,本次测量结果报告为:(2.74 log10±0.54 log10)CFU/g(包含因子k=2),转换成自然值取整数为200 CFU/g ~ 1900CFU/g(包含因子k=2)。

    5 结论

    影响卫生纸中细菌菌落总数的测量不确定度的因素比较多,除上述不确度来源外,还有培养基试剂、样品、次级取样、基质、随机误差等方面的来源,但它们对合成标准不确定度的贡献较少,所以本文主要对4.1中提到的不确定度来源进行分析。经过上述结果与讨论可以得出,重复性不确定度产生的主要原因是试验操作,因此在平常检验过程中要注意人员操作的规范性。

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