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色谱峰型异常,求教

  • 我是小小神哈
    2017/11/21
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 如题所示,色谱峰型异常,方法是流动相:乙腈与1.29g乙酸铵(冰乙酸调PH=4.0)以体积比16比84混合;等度洗脱,流速为1mL/min;柱温为30℃;进样量为20μL,但是最近色谱峰型很怪,标准品重新配了,还是这样,第一张图是原来的,第二张图是现在的。
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  • 夏天的雪

    第1楼2017/11/21

    应助达人

    色谱柱性能下降,柱效降低,看11min左右的峰,以及带星号的峰,峰宽变宽了。冲洗活化一下柱子,或者更换色谱柱

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  • 我是小小神哈

    第2楼2017/11/21

    请问怎么活化色谱柱呀

    夏天的雪(bingwang228) 发表:色谱柱性能下降,柱效降低,看11min左右的峰,以及带星号的峰,峰宽变宽了。冲洗活化一下柱子,或者更换色谱柱

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  • lijing320323

    第3楼2017/11/21

    色谱柱柱效降低,样品浓度低

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  • 我是小小神哈

    第4楼2017/11/21

    是的 样品浓度是15ug/mL

    lijing320323(lijing320323) 发表:色谱柱柱效降低,样品浓度低

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  • weiweijunling

    第5楼2017/11/21

    应助达人

    看法一样,更换色谱柱

    夏天的雪(bingwang228) 发表:色谱柱性能下降,柱效降低,看11min左右的峰,以及带星号的峰,峰宽变宽了。冲洗活化一下柱子,或者更换色谱柱

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  • hujiangtao

    第6楼2017/11/21

    应助达人

    应该h是柱效降低了

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  • 夏天的雪

    第7楼2017/11/22

    应助达人

    反相柱就用甲醇、乙腈、异丙醇、水等清洗,如果色谱柱允许反冲,可以断开检测器进行反冲

    我是小小神哈(v2871750) 发表: 请问怎么活化色谱柱呀

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  • hnteng

    第8楼2017/11/23

    问题不算太大。实际上你的柱子情况还算很好的。我们的柱子曾出现过一个样品打下去出现一个明显肩峰的情况,也挽救过来了。如果你这样的情况就换柱子,那成本就太高了。
    处理方法:
    先用高比例水(如:甲醇:水-20:80)0.3ml/min冲40分钟左右,然后过渡到高比例有机相(如:甲醇:水=90:10,或者纯甲醇)0.3ml/min冲30-40min,然后0.5ml/min纯甲醇、1.0ml/min纯甲醇冲,冲完后观察效果。如果不行,多反复几次,一般像这样的小问题都能解决。
    平常测完样之后一定要记得,先用高比例水、低流速冲,然后过渡到高比例有机相冲,注意,一定要先用低流速。最后用较高流速冲半小时足够。
    很多做HPLC的人做完后就是直接用纯甲醇或纯乙腈1ml/min冲柱子的,这是偷懒。这样不一定能冲好的。按我的方法去做,一般能解决。
    我们平常有进不测样,也时不时用低流速冲一冲。这样测样时基本不会出现太多问题。

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