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请大神帮我看看这是什么原因造成的

液相色谱(LC)


  • 这是今天跑的结果,第一张图是谷氨酸标准品,第二张图是空白对照,请问各位大神第一张图为什么会出现这种情况。由于之前做的时候谷氨酸跑不出来,怀疑是衍生试剂浓度太低,今天加大了衍生试剂浓度就这样了,衍生试剂是opa,请问有大神知道这是怎么回事吗
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  • m3180044

    第1楼2018/01/21

    又不说仪器配置,又不说具体方法,爱莫能助~

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  • sunely

    第2楼2018/01/21

    用的高效液相色谱仪是waters2695-2475,衍生试剂是OPA,流动相A是50mmol/L的醋酸钠溶液(ph6.5),流动相B是乙腈,激发波长340,发射波长455,柱温30, 衍生试剂:5mgOPA溶于500ul甲醇,加入50ulβ巯基乙醇,最后加入1ml 0.05mol pH=9.5的四硼酸钠溶液。
    衍生化过程:取100ul谷氨酸标准品溶液(1mg/ml),加入100ul衍生试剂,衍生2min,进样检测。

    m3180044(m3180044) 发表:又不说仪器配置,又不说具体方法,爱莫能助~

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  • m3180044

    第3楼2018/01/21

    浓度太高,峰平头了。降低样品浓度或者减小检测器光电倍增管的增益值。

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  • 有水有渝

    第4楼2018/01/22

    应助达人

    建议再拿几个其它氨基酸试试能不能衍生,如果还不行,要检查一下是不是衍生试剂变质了。

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  • 夏天的雪

    第5楼2018/01/22

    应助达人

    图一的平头峰是衍生试剂的浓度太高了,衍生出现这样的峰很常见。图二是否加入了衍生试剂?8~16min左右的基线貌似不好

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  • 夏天的雪

    第6楼2018/01/22

    应助达人

    图1中20min左右的是谷氨酸钠的峰?

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  • sunely

    第7楼2018/01/22

    是的,加了衍生试剂。

    夏天的雪(bingwang228) 发表:图一的平头峰是衍生试剂的浓度太高了,衍生出现这样的峰很常见。图二是否加入了衍生试剂?8~16min左右的基线貌似不好

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  • Insp_9a121f15

    第8楼2018/02/08

    建议衍生时间长一点,然后样品浓度增加一点。试一下

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  • lijing320323

    第9楼2018/02/09

    哪个是主峰?

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  • 夏天的雪

    第10楼2018/02/09

    应助达人

    后面的小峰应该是主峰,前面的应该是衍生试剂的峰

    lijing320323(lijing320323) 发表:哪个是主峰?

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