【求助】新手请教各位高手：荧光的相对强度应该怎么理解？

荧光物质所发出的荧光光子通过发射光路系统进入光电倍增管，而产生的电信号强度，积分，放大后显示出来，荧光相对强度其实就是电流信号。

这是我理解的。

应助达人

（1）首先这是一个单位量纲的问题；荧光分析与吸收光谱不一样，吸收光谱是符合朗伯－比尔定律的，因此吸收光谱的信号是有单位的，如：T%,Abs；无论何厂家的分光光度计，对于计量检测的专用标准（如：钬玻璃、钕玻璃、中性玻璃）的检测值均是一样的（绝对值），否则仪器就是不合格，这也就是为何分光光度计必须要经过计量部门强制检验的原因。
（2）荧光仪就不一样了，由于荧光仪不符合朗伯－比尔定律，故它的信号值只能用强度表示。加之荧光仪的光源、检测器的各向异性以及不能象分光光度计似的可以做基线校正，即使同一个样品在两台同型号的仪器上测量其荧光值也不尽相同，因此荧光仪的测试结果只能是相对的，不可能是绝对的。
（3）衡量评价一台荧光仪的灵敏度及性能，一般是用纯水的拉曼峰强度与相同位置的噪声之比来判断。之所以没有标准物质来检验一是标准物质的配制稍有微小的误差均会产生相差很大的结果（荧光仪检测太灵敏了），二是因为上述所谈的荧光仪的相对性，而水是不能产生荧光的，没有浓度的差别（当然不纯的水例外）；即使使用纯水，由于各个厂家的测试条件设置的不同（如狭缝负高压的大小不同）其性能比对也很难。

太谢谢了！！！

其实只要对光谱仪作一个绝对光强度校正后就可以显示绝对强度了，只是做校正比较麻烦，而且也没什么意义，再者由于仪器的状态和一些外部因素可能会导致绝对强度校正系数发生变化，因此没有那个厂家会去做这个校正的。另外，也可以通过标准物校正的方法来解决每个厂家的荧光信号不一致的问题，但目前美标局还没有找到一个合适的标准物来进行校正，外面倒是有一些公司推出了荧光标准物，但是好像没有那个厂家感兴趣，所以大家也就只有忍受这种不一致了。

NIST以前出过的一个荧光标准样品，不过由于标准样的稳定性和实用性的问题，现在已经暂停发售了。
SRM1932

，收到，谢谢

不过，在测量固体样品的绝对荧光量子产率的时候，绝对强度还是需要的。当然，标定过程极其繁琐。

大部分时候，相对的强队就够了。