脂肪性样品农药残留的提取

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⑵. 鱼和动物组织净化
①. 原理
为避免在净化过程中出现超净化能力的现象，应细心称量提取出的脂肪量。经过乙腈和石油醚液-液分配，可以将脂肪中的残留农药分离出来。在乙腈和石油醚分配体系中，大多数脂肪留在石油醚相，而残留农药则进入乙腈相中。当向乙腈相中加入水时，可以降低农药在乙腈中的溶解度，使乙腈相中残留农药重新分配到石油醚相中。
在弗罗里硅土吸附柱上将溶液中残留农药从样品共提物中分离出来；用极性递增的淋洗液将柱上的农药残留洗脱下来。
②. 测定脂肪量
净化方法可用于≤3g脂肪。从提取的脂肪溶液中蒸发掉溶剂后，按下列操作步骤之一来测定提取的脂肪量：
当样品中总脂肪含量＞3g时，并且分析的残留农药是不易挥发的，可用少量石油醚将浓缩提取液转移到已称量的烧杯中，用干空气流在蒸汽温度下吹干。称量并记录提取脂肪的质量。取 ≤3g的脂肪用于净化。按下式计算分析样品的重量：

当已知样品中的脂肪含量＜3g时，不必进一步蒸发溶剂，净化全部脂肪溶液样品。以原样重量为分析样品重量。
当已知脂肪含量＞3g或者残留水平很高时，不必进一步蒸发溶剂，取已知、适量体积的提取溶液，转入已称量的烧杯中。蒸掉溶剂，称量测定脂肪含量。净化含有≤3g脂肪，按下式计算分析样品的重量：

③. 乙腈/石油醚液液分配
称取≤3g脂肪放入125mL的分液漏斗中，添加石油醚使分液漏斗中的脂肪和石油醚总体积为15ml 。如果液-液分配时，出现产生乳化现象的趋势时，石油醚用量可更少。
加入石油醚饱和的乙腈30mL，剧烈振摇1min，静止分层，将乙腈相转入已预先加入650mL水、40mL饱和氯化钠和100mL石油醚的1L分液漏斗中。
在125mL分液漏斗中用以石油醚饱和的乙腈每次30mL提取石油醚3次，每次剧烈振摇1min，将全部提取液合并于1L的分液漏斗中。
将1L的分液漏斗横置，充分混合30—45秒，静止分层。水相转入第二个1L的分液漏斗。
在第二个1L的分液漏斗中加石油醚100mL ，剧烈振摇15秒，静止分层。弃去水相，将石油醚相合并到原先的1L分液漏斗中，并用100mL?2水洗涤。
弃去洗涤液，将石油醚相通过25mm?50mm的无水硫酸钠柱子转入K-D瓶中。用10mL?3的石油醚依次淋洗分液漏斗和无水硫酸钠柱。
在K-D瓶中加入沸石，将合并的提取液和淋洗液浓缩至5-10mL转移到弗罗里硅土柱，净化。

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④. 弗罗里硅土柱净化
方法一：
在内径为22mm的层析柱中加活化过的弗罗里硅土约10cm（或按月桂酸值计算用量），再加约1.5cm的无水硫酸钠。用40-50mL石油醚预湿柱子，用可定容或刻度接收瓶的K-D瓶接受淋洗液。
将样品的提取溶液转移到层析柱上，以约5mL/min的速度通过层析柱。用2次5mL石油醚润洗容器和硫酸钠（如果有无水硫酸钠），将润洗液转入柱子，另取少量石油醚淋洗层析柱壁。用200mL6%乙醚/石油醚的淋洗液以约5mL/min的速度淋洗层析柱；更换K-D瓶，用200mL15%乙醚/石油醚的淋洗液以约5ml/min的速度淋洗层析柱；更换K-D瓶，用200mL50%乙醚/石油醚的淋洗液以约5ml/min的速度淋洗层析柱。
在K-D瓶中加入沸石，将每一种淋洗液浓缩至适当体积，待测。需要体积＜5mL时，最后的蒸发过程中，接收瓶连接二球微型Snyder或Vigreaux柱。
第一种淋洗液（6%乙醚/石油醚）通常无需进一步净化就可用于GLC检测。
方法二
原理：
用二氯甲烷、正己烷和乙腈的混合溶液淋洗弗罗里硅土柱。尽管层析柱中的90%的脂肪都能被第三种淋洗液淋洗下来，但结果表明第二种淋洗液比方法一中第二种淋洗液的淋洗效果更为干净。与方法一相比本方法中的3种淋洗液可淋洗极性更大的农药。本方法更实用于脂类和油类的分析、硫丹残留分析以及环氧七氯和环氧八氯的分离。
淋洗液：
淋洗液1：20%二氯甲烷/正己烷（V/V）。用正己烷稀释200mL二氯甲烷，混合物达室温时，用正己烷定容至1L。
淋洗液2：50%二氯甲烷/0.35%乙腈/49.65%正己烷（V/V/V）。吸取3.5mL乙腈加入500 mL二氯甲烷中，用正己烷稀释。混合达室温时，用正己烷定容至1L。
淋洗液3：50%二氯甲烷/1.5%乙腈/48.5%正己烷（V/V/V）。吸取15mL乙腈加入500mL二氯甲烷中，用正己烷稀释。混合达室温时，用正己烷定容至1L。
净化步骤：
除弗罗里硅土净化按如下所述的步骤外，其余按方法一完成。
在内径为22mm的层析柱中加活化的弗罗里硅土10cm（或按月桂酸值计算用量），再添加约1.5cm的无水硫酸钠。用40-50mL石油醚预淋柱子，用可定容或刻度接收瓶的K-D瓶接接收淋洗液。
将样品提取溶液转移到层析柱上，并以约5mL/min的速度通过层析柱。用5mL?2正己烷润洗容器和硫酸钠（如果有无水硫酸钠），将润洗液转入柱中，另取少量正己烷淋洗层析柱壁。用200mL淋洗液1以约5mL/min的速度淋洗层析柱。更换K-D瓶，用200mL淋洗液2以约5mL/min的速度淋洗层析柱。更换K-D瓶，用200m淋洗液3以约5mL/min的速度淋洗层析柱。
在K-D瓶中加入沸石，将每一种淋洗液浓缩至适当体积。需要体积＜5mL时，在蒸发过程中，使用二球微型Snyder或Vigreaux柱。
方法三
原理：
用乙醚/石油醚混合物淋洗前，用石油醚淋洗弗罗里硅土，可使多氯联苯与大多数的残留农药分离。
净化步骤说明：
除在用6%乙醚/石油醚的淋洗液淋洗弗罗里硅土柱之前插入以下步骤外，其余按方法一完成。
用250mL石油醚以约5mL/min的速度淋洗层析柱，更换K-D瓶。

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一看这个步骤，应该是5009系列，布氏漏斗最好有小泵抽取，速度会快些。

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是的，就是对GB5009系列农药残留样吕处理、净化进行解读。

厉害

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厉害。。。。

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标准是越来越进化了，5009系列用萃取法，不适合于大批量的样品处理，NY761比它进了一步，Quechers法又简单了一步。

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农药不少是脂溶性物质，从脂肪中不好提取呀