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如何制备高质量血清样品——分离血清篇

栀子花开

2018/07/07
分析者端木精英队

前处理综合讨论

如何制备高质量血清样品——分离血清篇

在动物疫病抗体检测时，需要高质量的血清样品，基本要求是：澄清、无溶血、无腐败。要做到上述要求，需要从以下几个方面加以注意：
6析出血清
血液样品采集后，如果立即进行离心，血清量是比较少的。正确的做法是：采血后迅速将容器平放，以增加血块面积，提高血清自然析出效率；室温静置2小时左右，即可见多量血清自然析出。
血液样品静置的时间要根据室温合理调节：夏季气温30℃时，不到0.5h即可；春秋两季气温20℃~25℃时，约需1h~2h；冬季气温低于10℃时，基本不会自然析出，需回到实验室后置于25℃温箱2h左右方可。
特别要注意的是，夏季采样时要慎用冰袋，冰袋与采血器之间应用隔热性能较好的泡沫、纸屑等进行隔离，厚度不能少于5cm。如果冰袋直接接触采血器，血液样品极可能因为低温而导致溶血。
7分离血清
常规的做法是：将采血器置于离心机中，以4000 r/min离心10min左右，然后用移液器将血清转移至另一洁净离心管中。
这种做法的最大缺陷是：不分血液自然析出情况，机械地采用同一标准进行处理，对于析出情况好的浪费了时间，对于析出情况不好的可能无法分离血清，或者血清量不够时易将血细胞带入血清中，冻融后溶血影响检测质量。
我们对此进行了改进，先对血液自然析出情况进行观察，将样品分为两类：
A类：析出的血清已经足够实验所需，分离方法为：直接将血清倒入洁净离心管，以8000r/min离心5min，然后用移液器将血清转移至另一洁净离心管，备用。
B类：析出的血清不能满足实验所需，分离方法为：将采血器置于25℃温箱，每隔0.5h检查一次血清析出情况，满足A类要求的挑出按A类处理，否则继续处理。2h后血清析出情况仍不理想的，将采血器置于离心机，以4000 r/min离心10min后，用移液器将血清（可含部分血细胞）全部转移至洁净离心管，以8000r/min离心5min，然后用移液器将血清转移至另一洁净离心管，备用。
使用改进方法分离血清数千份，效果良好，未发现有溶血情况存在。

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栀子花开

第1楼2018/07/08

应助达人

姊妹篇《如何制备高质量血清样品——采血》同期发布，网址http://bbs.instrument.com.cn/topic/6903851

0

端木

第2楼2018/07/09

好像今年的防疫大比武又开始了

0

栀子花开

第3楼2018/07/09

应助达人

今年的比武侧重防疫技能，没有监测的内容
端木(icetrob)发表:好像今年的防疫大比武又开始了

0

沧海青城

第4楼2018/07/09

应助达人

还是得把传图功能解决了才好

0

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