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色谱柱的“维密秀”

吕梁山

2018/08/28

色谱柱的“维密秀”
HPLC（高效液相色谱）是实验室重要的 “分离”手段，而色谱柱则堪称分离的心脏。日常使用HPLC不免会遇到由色谱柱引起的各种故障，因此提前做好维护保养色谱柱的工作十分重要。今天小编就送大家一套色谱柱维护保养的小秘密，简称“维密”。
一、试验样品需过滤
若试验样品中的不溶物进入色谱柱，则会引起入口过滤器及填料堵塞，柱压上升，从而破坏分离，因此样品应尽可能以清洁的状态注入。不论在什么情况下，建议用0.5μm左右的过滤器过滤一下样品。
二、谨防色谱柱污染
有时样品经过过滤，仍会发生色谱柱堵塞、污染等情况，这可能是由于样品中存在的夹杂物使溶解性差的成分向流动相析离、被填料牢固保持的夹杂成分的吸附、微型注射器污染等原因引起的。所以最好在分析前使用过滤器和防护柱，将这些污染尽可能地除去，过滤器中通常装有孔径为 1μm 左右的滤网，可有效除去引起堵塞的物质；防护柱是安装在分析柱前面的短柱，起到捕捉牢固吸附于填料上夹杂成分的作用。
三、保证色谱柱洁净
上面提到的防护柱其清除污染的作用有限，因此色谱柱在使用之后，当根据样品的不同，在每数次分析样品之后进行一次清洗。
四、色谱柱轻拿轻放
色谱柱中填满了数微米大小的细小粒子，应避免冲击和外部压力的急剧变化，防止损伤柱子。
五、确认流动相的制约
有时色谱柱会因流动相的pH、有机溶剂量等受到制约，因此需充分确认之后再使用。
六、按需要使用不同的色谱柱
若一支色谱柱用于各种分析，则前面的测试数据有时不会重现。此外，如果重复进行流动相条件差别较大的分析，也会加速色谱柱的劣化。因此请务必做好各个色谱柱的使用记录。
常见色谱柱故障现象图

现象：①为新柱时的色谱图，随后在使用过程中色谱图在峰根部出现拖尾（如②所示），再继续使用下去，便像③所示，最后变成④所示的两个峰。
判断：这时可注入其它成分观察一下，确认是否出现同样的现象。如果出现同样的现象，则考虑是柱入口过滤器或填料被污染，或者是填料入口有间隙。
操作：可小心地卸下入口的端盖查一下入口处有无出现间隙。如果有间隙出现，请填放同样的填料，如果一时没有相同的填料，也可用硅石棉作为应急措施。如果没有间隙的话，请用超声波清洗器仔细洗净入口过滤器。
转自微信公众号《津津贫道》

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WUYUWUQIU

第1楼2018/08/29

应助达人

这个是基本要求，通用

0

吕梁山

第2楼2018/08/29

对，这个文章很有代表性
WUYUWUQIU(wulin321) 发表:这个是基本要求，通用

0

wsy18

第3楼2018/08/29

使用中防止柱子污染是重点。

0

吕梁山

第4楼2018/08/31

对，一定要减少污染的存在
wsy18(wsy18) 发表:使用中防止柱子污染是重点。

0

wsy18

第5楼2018/09/10

流动相与样品的处理是关键。
吕梁山(shih20j07) 发表:对，一定要减少污染的存在

0

wsy18

第6楼2018/09/10

流动相与样品的处理是关键。
吕梁山(shih20j07) 发表:对，一定要减少污染的存在

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