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帮忙分析一下我们的液相色谱 拜托拜托

  • Insm_c42354be
    2018/08/28
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 我是第一次做液相。没有人带,老师也没空。我今天发现我们的仪器参数里面的LC停止时间没有设置为0.01min。一个往届学姐(有一部分液相部分和我们现在做的内容一模一样)已经毕业,只有她的数据。然后她的LC停止时间为60min。其他的都一样。然后我们和她的乙腈流动相比例一样,所用柱子,柱温一样,在乙腈比例70%的时候,发现她的样品分离度完全分开,做得特别好。但是我们的不行,要乙腈比90%才能分开,而且还有一点点连着。
    求问:1.分离度不好和LC停止时间有关系吗?
    2.听实验室的一个师兄说,我们现在的压力是那个毕业学姐压力的2-3倍,请问是我们的柱子堵了吗?或者污染了?或者柱效下降了?
    麻烦大家帮忙分析一下、拜托了~
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  • www

    第1楼2018/08/28

    应助达人

    1.分离不好,柱子的原因,跟停止时间无关。停止时间只是采集停止的时间,换句话就是图谱的横轴长度
    2.压力大,跟流动相有关,不同的流动相产生的压力是不一样的。如果你现在用的流动相和小姐姐的一样,那就得怀疑系统是否有堵的地方,分段逐级排除。。柱子堵的可能不是没有

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  • sdlzkw007

    第2楼2018/08/28

    应助达人

    (1)分离度不好和LC停止时间没有关系
    (2)压力太大有可能是色谱柱或者在线过滤器堵塞,也可能是检测器流通池堵塞,还有可能是流动相盐析出来管路部分堵塞。色谱柱堵塞可能导致柱效下降,也可能导致分离度不好。

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  • 庄周遇上猫

    第3楼2018/08/28

    分离度不好一般是柱子的问题,也可以看看流速,调整流速看看是否能分离

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  • 有水有渝

    第4楼2018/08/29

    应助达人

    1、用的是哪个型号的仪器,如果是岛津的停止时间设置为0.01min,意思是持续采集,仪器不自动中止,需要手动停止。设置60min的意思是到这个时间仪器自动终止采集,分析结束。具体设置哪个时间看实际需要操作,所以分离好不好跟停止时间没有关系,只要停止时间不比你要的那个峰的出峰时间短即可,另外,你用的是等度洗脱还是梯度洗脱?
    2、另外如果是反相色谱,学姐在70%乙腈的时间分离度好,而你要90%乙腈还好,这一点不常规,应该是乙腈比例越小分离度越好,但保留时间也越长,你肯定你用的跟你学姐是同一根色谱柱吗?如果是同一根,同样的流动相下压力却大2-3倍,那肯定是柱子污染、堵塞了,需要清洗干净再使用。

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  • Insm_c42354be

    第5楼2018/10/22

    好的,谢谢你~

    sdlzkw007(sdlzkw007) 发表:(1)分离度不好和LC停止时间没有关系(2)压力太大有可能是色谱柱或者在线过滤器堵塞,也可能是检测器流通池堵塞,还有可能是流动相盐析出来管路部分堵塞。色谱柱堵塞可能导致柱效下降,也可能导致分离度不好。

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  • Insm_c42354be

    第6楼2018/10/22

    谢谢~非常感谢

    www(cxm2009) 发表:1.分离不好,柱子的原因,跟停止时间无关。停止时间只是采集停止的时间,换句话就是图谱的横轴长度2.压力大,跟流动相有关,不同的流动相产生的压力是不一样的。如果你现在用的流动相和小姐姐的一样,那就得怀疑系统是否有堵的地方,分段逐级排除。。柱子堵的可能不是没有

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  • Insm_c42354be

    第7楼2018/10/22

    我和实验室的师兄师姐确认过了,确认了用的就是是学姐的柱子,谢谢你啦,我们和老师商量换柱子了,非常感谢

    有水有渝(xky0230699) 发表:1、用的是哪个型号的仪器,如果是岛津的停止时间设置为0.01min,意思是持续采集,仪器不自动中止,需要手动停止。设置60min的意思是到这个时间仪器自动终止采集,分析结束。具体设置哪个时间看实际需要操作,所以分离好不好跟停止时间没有关系,只要停止时间不比你要的那个峰的出峰时间短即可,另外,你用的是等度洗脱还是梯度洗脱?2、另外如果是反相色谱,学姐在70%乙腈的时间分离度好,而你要90%乙腈还好,这一点不常规,应该是乙腈比例越小分离度越好,但保留时间也越长,你肯定你用的跟你学姐是同一根色谱柱吗?如果是同一根,同样的流动相下压力却大2-3倍,那肯定是柱子污染、堵塞了,需要清洗干净再使用。

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  • Insm_c42354be

    第8楼2018/10/22

    试过了流速、柱温,和流动相的比了,现在和老师商量换柱子了,谢谢你~

    庄周遇上猫(Insp_5f7a71ff) 发表:分离度不好一般是柱子的问题,也可以看看流速,调整流速看看是否能分离

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  • Insm_c42354be

    第9楼2018/10/22

    打算换柱子啦~谢谢你啦~

    www(cxm2009) 发表:1.分离不好,柱子的原因,跟停止时间无关。停止时间只是采集停止的时间,换句话就是图谱的横轴长度2.压力大,跟流动相有关,不同的流动相产生的压力是不一样的。如果你现在用的流动相和小姐姐的一样,那就得怀疑系统是否有堵的地方,分段逐级排除。。柱子堵的可能不是没有

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  • Insm_c42354be

    第10楼2018/10/22

    我们用的是等度洗脱的呢~总之,非常谢谢你们的帮助

    Insm_c42354be(Insm_c42354be) 发表:我和实验室的师兄师姐确认过了,确认了用的就是是学姐的柱子,谢谢你啦,我们和老师商量换柱子了,非常感谢

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