反冲液相C18色谱柱

应助达人

你是色谱柱堵了么？

应助达人

你先看看你的色谱柱适不适合反冲，反冲也只是去除留在柱头的杂质，如果你的柱子不适合反冲，你反冲的话会迅速降低柱效的，要谨慎操作！

应助达人

反冲要慎重，流速不能过高，0.5ml/min，柱子如果没有用到缓冲盐，纯甲醇低流速冲洗60min左右，不要接检测器，柱子出口直接连到废液瓶

应助达人

一些反冲色谱柱的方法：
一：如果是已经保存好的色谱柱：1.反向接柱，先用 95%水：5%乙腈 0.2 ml/min，冲 20 倍柱体积；然后用四氢呋喃，0.2 ml/min，冲 20 倍柱体积；最后用 95%乙腈：5%水，0.2 ml/min，冲 20 倍柱体积；2.正向接柱，用 65%乙腈水保存色谱柱。
二：如果是刚走完样的色谱柱，那么请按照下列步骤进行：1.卸掉保护柱 2.正向接柱，常规方法冲洗色谱柱（先 95水，后 95 乙腈或甲醇）；3.反向接柱，先用 95%水：5%乙腈 0.2 ml/min，冲 20 倍柱体积；然后用四氢呋喃，0.2 ml/min，冲 20 倍柱体积；最后用 95%乙腈：5%水，0.2ml/min，冲 20 倍柱体积；4.正向接柱，用 65%乙腈水保存色谱柱。
最终的保存条件可以参考色谱柱说明书进行调整。

注：1. 20 倍柱体积：250?4.6mm 大概 80ml；150?4.6mm 大概 48ml
2.反向接柱时不要接检测器！

如果友友的检测物质比较脏，建议还是增加保护柱的使用。反冲有风险，使用需谨慎（不得万不得已，不要反冲。）

应助达人

反冲色谱柱已造成柱效下降，需谨慎使用。

是的。。柱压高了很多。。正接清洗没什么效果。。在考虑要不要反冲。。

应助达人

反冲在柱子不行的时候再考虑，还能坚持使用的不要进行反冲

应助达人

已确定正向清洗无法恢复，反向冲洗前先问一下厂家是不是可以反向，如果可以，那么使用0.5ml/min，建议使用乙腈冲洗，压力更小，洗脱能力，冲洗至压力稳定，柱压不再下降为止，再把流速提升到1.0冲10分钟。恢复正向使用时也是很低流速冲洗10分钟，再恢复高流速。

应助达人

反冲已经是死马当活马医的情况才去弄，你可以问问厂家还有什么可以清洗的方法！