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二级柱后衍生系统
夏沫
2019/08/01
恒心永谱
私聊
其他仪器综合讨论
对于柱后衍生呢大家都很熟悉了,柱后衍生就是样品先经过色谱柱进行分离,样品组分经分离后从色谱柱中流出,在特定的条件下进行衍生化反应,使待测样品中的组分可以被检测器检出。柱后衍生系统是将高效
液相色谱仪
中通过色谱柱后的样液与衍生试剂混合,混合溶液在一定的时间内通过反应器完成反应,如果反应速度慢,可以通过加热反应器以提高反应速度。有些衍生反应则需要加入两种溶剂,也就是需要先后通过两种反应才能使待测样液完成衍生其检测性被提高,最后混合液进入检测器检测,这种情况呢就会用到二级柱后衍生系统,其中检测器一般为紫外可见光检测器和荧光检测器。最为典型的就是检测氨基甲酸酯类农药残留和检测水中的草甘膦。前者需先水解再进行衍生,后者需要先氧化再进行衍生。一个完整的柱后衍生系统是由计量泵、脉冲阻尼器、加热线圈、反应室组成。如下图所示:
要注意的是衍生试剂配置完成后必须经过过滤和超声脱气才能够使用,避免有杂质和气泡进入损坏管路和影响检测结果的准确性。在通电使用仪器之前先要检查电源插座是否良好接地,一定要确保连接好背面地线!如果发生管路大量漏液时可能对电气有腐蚀作用,长期腐蚀可能引起漏电,造成事故损失,因此请先确保仪器良好接地再给仪器通电!
当第一次使用该仪器时,作为衍生系统动力装置的输液泵以下操作步骤不可少:
1.连接所有使用的液路管和衍生试剂,吸取衍生试剂液路管头上要安装溶剂过滤头。
2.拧下排气阀废液口上的PEEK头和废液管。
3.取出厂家配备的备件包中新的PEEK头和注射器。
4.将注射器装好吸液枪头后在排气阀废液口。
5.打开排气阀后,用手抽动注射器进行手动吸液。
6.当衍生试剂进入注射器内,观察并确定进液管内无明显气泡后关闭排气阀。
7.换上废液管。
8.开始运行输液泵。此时必须要确定泵腔内有液体且无气泡才可以运行泵,否则运行泵时会损坏泵头。两个泵都要经过此操作后才可以开始运行。
二级柱后衍生装置安装完成后,在使用它来检测时,我们要先配置好检测所需的流动相和衍生试剂,配置好后进行过滤和脱气处理后才可使用,将处理好的流动相更换到
液相色谱仪
,再将
液相色谱仪
开机,待仪器自检过后,设定好实验所需的各项参数,接下来进行排气泡工作。气泡排完后用流动相先冲洗一下整个色谱系统。接下我们把衍生试剂更换到衍生装置上,将二级衍生装置开机,设定好实验所需流速和温度,用衍生试剂冲洗衍生系统,待反应条件达到试验所需时,将衍生系统与色谱柱相和检测器相连接,继续用流动相和衍生试剂的混合溶液冲洗系统,待基线达到平稳后,我们就可以准备进样啦。
进样结束后我们要把反应温度设置成室温,继续冲洗整个系统,待反映温度降至室温,关闭三个输液泵,将衍生系统与色谱柱和检测器断开连接,将色谱柱接和检测器相连接,将流动想换成甲醇水,启动泵冲洗整个系统三十分钟后关闭
液相色谱仪
,如长时间不使用
液相色谱仪
,将色谱柱拆下来连接保护住密封保存好。将衍生试剂换成超纯水,冲洗系统三十分钟后关闭二级衍生装置。最后进样阀也要反复冲洗。所有仪器和工作站关闭后,关闭总电源。
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