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梯度洗脱-流动相预混合问题

wxyshirley

2019/08/15

液相色谱（LC）

流动相预混合可以优化梯度洗脱条件，提高检测精度，下面有个这样的例子，但是我不明白，为什么为什么溶剂B的变化变为44%-65%，请老师帮忙解释下，谢谢！以下是例子：
以一个分析分子量大约为1000Da合成肽的试样为例，经优化后，洗脱条件为：0.1%三氟乙酸水溶液为溶剂A，0.1%三氟乙酸的乙腈溶液为溶剂B，在1.5ml/min的流速下，30min内19%-24%B的线性梯度。因为梯度陡度只有5%B/30min,在此情况下，连续进样时保留时间的重现性不能达到低于0.25min，如果预混合溶剂，以10/90乙腈/0.1%三氟乙酸水为溶剂A，30/70乙腈/0.1%三氟乙酸水溶液为溶剂B，则相当的梯度约为在30min内44%-65%B的变化，由于梯度陡度的增加，梯度较少受仪器硬件的制约，保证了保留时间的重现性。

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hujiangtao

第1楼2019/08/15

应助达人

按时间算出来的理论值吧

0

有水有渝

第2楼2019/08/15

应助达人

你把不同时间时，纯乙腈的绝对量算出来比较一下就知道了，纯乙腈的量越高，梯度越陡

0

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