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蛋白质检测的问题

  • libingyong0056
    2019/09/06
  • 私聊

食品常规理化分析

  • 我用凯氏定氮法来做的,检测螺旋藻。取0.2-2克的螺旋藻和0.2克硫酸铜,6克硫酸钾,20ml硫酸消化,泡沫消失后直接变成了碳状物质,根本就不会出现蓝绿色透明液体,我都是直接用蒸馏水溶解后过滤的。不知道怎么回事?还有蒸馏后滴定时,颜色还是指示剂的蓝色(用的是甲基红和亚甲基蓝2:1来配置的),看不见滴定终点,不知道哪出了问题????郁闷的很。我以前都没有做过蛋白质这个实验,很多地方不懂,大家指点下。谢谢了
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  • 我是风儿

    第1楼2019/09/06

    应助达人

    你消化处理时硫酸铜:硫酸钾:硫酸的比例不合适,处理后呈碳状就说明你的样品消解时加入的硫酸钾太多了,硫酸的沸点太高,被挥发光了,蛋白质没有消解出来,

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  • 我是风儿

    第2楼2019/09/06

    应助达人

    用蒸馏水溶解过滤这个操作不对,呈蓝色说明没有滴定单终点,估计你的蒸馏液有被碱污染了,整个蒸馏的管路好好洗下,直至空白值正常为止(空白消耗0.1摩尔每升的盐酸液小于0.05毫升)

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  • sdlzkw007

    第3楼2019/09/06

    应助达人

    现在有现成的催化剂片,可以使用对比一下看看。如果可以的话使用自动凯氏定氮仪,操作简单,结果稳定,现在国产的全自动,半自动凯氏定氮仪有很多,价格不贵。

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  • Insm_5809e2e3

    第4楼2019/09/19

    1.出现碳状,是黑色?
    说明消化不完全,可适当延长消化时间
    2.消化片或是0.4g硫酸钾/硫酸钠+6克硫酸铜
    3.指示剂是用95%乙醇配好后再混合或是临用时加入几滴到硼酸吸收液里,滴定都会有蓝色/蓝绿色/绿色→灰红色

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  • Insm_5809e2e3

    第5楼2019/09/19

    另外,看不到终点,有没有试过直接倒盐酸进去看变色没有,从而判断是不是含量高没到终点或是盐酸浓度太低

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  • zftxy2001

    第6楼2019/09/20

    有道理

    我是风儿(nphfm2009)发表:你消化处理时硫酸铜:硫酸钾:硫酸的比例不合适,处理后呈碳状就说明你的样品消解时加入的硫酸钾太多了,硫酸的沸点太高,被挥发光了,蛋白质没有消解出来,

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  • 快乐

    第7楼2019/09/23

    应助达人

    以前我们同事也遇到过指示剂失效的事,你先确认一下指标剂是否正常

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