安捷伦高效液相色谱梯度洗脱条件这样少填写了会造成啥样的后果

应助达人

如果你用的是250的柱子直接在40分钟后面加7分钟平衡一下即可，如果用的是短柱150的，5分钟平衡就够了。

应助达人

看基线平稳，可能3分钟，也可能5分钟，根据实际情况

能不能仔细看看我叙述的，再帮我解答一下啊~新手不懂

能不能仔细看看我叙述的，再帮我解答一下啊~新手不懂

我认为你的梯度最后设的不合适，30分钟后1分钟恢复初始比例就行，然后再等度9分钟.等度的目的是平衡下一阵

至于你的时间长短，应该根据你的成分来，如果完全洗脱完，可以根据情况缩短时间。

这样么？这么快变到初始浓度会不会突然有个大倒峰？文献中的前十五分钟是不是就是用来平衡？这样后面的九分钟等度有必要么？

应助达人

1设置的方法没设置好能运行吗？2可以放在后面平衡，没问题

我现在在每一针的结束就让它十分钟梯度运行将甲醇浓度从100降到25，没有设定维持25等度甲醇平衡的时间，这样第二针一下子就连基线都跑不好了，我以为第二针的0-15是用来平衡的，平衡好了在第二针梯度洗脱的时候可以正常，但是0-15min好像根本没有起到平衡的作用，基线都变成负值了。下图分别是序列的第一针和第二针up水，麻烦看一下。