如何处理“鬼峰”

如何处理“鬼峰”

今天处理的问题仍然是糖类药物分析过程出现的“双峰”问题，是在解决“如何解决液质异常出峰实例”https://bbs.instrument.com.cn/topic/7357857_1后发生的，感兴趣的老师可以浏览我上一篇文章。分析的样品是糖类物质，其选用的色谱柱为资生堂PC HILIC柱，而其资生堂色谱柱与飞诺美HILIC色谱柱的使用比较我也写了一篇分享。

糖在生物体内普遍存在，对生物体结构和生命活动起重要作用。近年来，随着人们对糖类生物生物功能的不断深入了解，关于糖的研究已成为化学和生物学领域研究热点之一，尤其是糖蛋白中的寡糖链在生命过程中参与蛋白的靶向、细胞识别及抗体-抗原相互作用等生理过程。对其结构和功能的研究成了继DNA和蛋白质后又一重要课题。而糖类药物不同于化药，结构不单一，分离困难和结构解析复杂都成了难题。

下图是我们再一次使用HILIC柱出现的问题，出现双峰，很影响定量测定，而双峰出现的问题在哪里呢？我们首先怀疑是否存在柱前污染，导致此种现象发生。那么检验方法就是进一针空白样品，在保证空白样品没有被污染的前提下，我们发现结果并没有在1分钟出峰。那么柱前污染的因素被排除了。

那么保留时间延长避免上一针对下一针产生的影响也消除了。还有哪里会出现问题呢。

我们回忆了整个操作流程，还有几个疑点没有解决：

1、样品母液是否存在降解？

2、混合的流动相会不会出现盐析？

针对两个疑问，我们开始重新配置标准溶液，将母液和标准液放在低温冷藏是个好习惯，因为没有人可以保证样品不会出现降解。我们又重新配置了盐溶液，如果流动相含盐高，那么我们应该经常在样品分析结束后将系统流路冲净，并且打开seal wash冲洗柱塞杆，避免盐析影响泵液。解决了上述问题，我们的色谱峰也回归了原来的样子~

最后感谢仪器信息网提供原创大赛为我们提供学习和交流的平台！