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如何在反相中增加氨基酸的保留时间？

提莫酱爆小蘑菇

2019/11/04

液相色谱（LC）

目前有两个化合物，一个3氨基-2-甲基苯甲酸和5-氨基-2-甲基苯甲酸。
这两个在普通的C18柱中出峰很靠前，尝试了很多流动相把他们两个分开了，但是目前峰还是太靠前，约3分钟，领导要求把这两个保留时间往后调，至少五分钟以后……
但是我手里目前就两根反相柱，一根Shim-pack Scepter C18，5um*4.6*250的，还有一根苯基己基柱。
尝试了一下用苯基己基柱，甲醇:水50:50，流速1ml，柱温35℃。发现出峰约4分钟，两个峰还重叠了……

请问还有什么办法可以分离……

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hujiangtao

第1楼2019/11/04

应助达人

加庚烷磺酸钠等离子对试剂试一下

0

提莫酱爆小蘑菇

第2楼2019/11/04

但是听说用了庚烷磺酸钠的柱子没有办法再做其他的了，是这样么？
hujiangtao(hujiangtao) 发表:加庚烷磺酸钠等离子对试剂试一下

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检测老菜鸟

第3楼2019/11/04

应助达人

这两个化学结构挺相近的，一般我碰到这样的不查pka的情况就是先加碱，不行加酸，再不行上普通缓冲盐，再不行就按楼上的说法，离子对试剂。你要会查文献的话就更好办了。

0

检测老菜鸟

第4楼2019/11/04

应助达人

没这个说法
提莫酱爆小蘑菇(m3116636) 发表:但是听说用了庚烷磺酸钠的柱子没有办法再做其他的了，是这样么？

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提莫酱爆小蘑菇

第5楼2019/11/04

查出的PKA都不太靠谱……用chemdraw画出来，pka在3.889，我自己试了加酸，加酸会降低保留时间，反而中性条件下还好一些
检测老菜鸟(v3295053) 发表:这两个化学结构挺相近的，一般我碰到这样的不查pka的情况就是先加碱，不行加酸，再不行上普通缓冲盐，再不行就按楼上的说法，离子对试剂。你要会查文献的话就更好办了。

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hujiangtao

第6楼2019/11/04

应助达人

用完冲洗干净就行了
提莫酱爆小蘑菇(m3116636) 发表:但是听说用了庚烷磺酸钠的柱子没有办法再做其他的了，是这样么？

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提莫酱爆小蘑菇

第7楼2019/11/04

好的，谢谢
hujiangtao(hujiangtao) 发表:用完冲洗干净就行了

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zftxy2002

第8楼2019/11/04

有道理
提莫酱爆小蘑菇(m3116636)发表:查出的PKA都不太靠谱……用chemdraw画出来，pka在3.889，我自己试了加酸，加酸会降低保留时间，反而中性条件下还好一些

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提莫酱爆小蘑菇

第9楼2019/11/04

尝试了水：甲醇80：20 等度洗脱，但是发现保留时间一直前移，尤其是3位的，比较明显。
温度35，流速1，C18柱，以下附图……
检测老菜鸟(v3295053) 发表:这两个化学结构挺相近的，一般我碰到这样的不查pka的情况就是先加碱，不行加酸，再不行上普通缓冲盐，再不行就按楼上的说法，离子对试剂。你要会查文献的话就更好办了。

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提莫酱爆小蘑菇

第10楼2019/11/05

问题已解决！

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