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安捷伦1260高效液相色谱梯度洗脱条件设置

kite503

2019/11/23

1. 40min时的流量和最大压力没有填写，梯度是不是就不能按照预设跑了？

2. 这个梯度洗脱的条件是按照文献（0-25min）条件自己改的（25-40min），不止这么思考是否正确，麻烦大神帮忙看看：文献0-15分钟是为了平衡柱子，15-25min是为了洗脱流出样品；文献后续就没有下文了，我看了书上面说梯度洗脱之后要进行柱再生和平衡啥的玩意儿，然后我就在25-30min用纯甲醇冲洗保证所有物质都能洗脱出来，30-40min再梯度过渡回起始流动相条件。我的疑问是：梯度洗脱后重生和平衡的必要性和重要性？原先文献0-15min平衡是否可以移到上一针的末尾设置上条件进行？40min一针是不是有点长？A 磷酸缓冲，B甲醇

kite503

第1楼2019/11/23

一般是先用初始流动相梯度平衡柱子（监测压力变化），再梯度洗脱，洗完后柱子保存在一定溶剂中（一般是甲醇，看条件）

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