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【分享】常用染色液和试剂的配制
核桃
2007/02/07
私聊
分析化学
一、埃利希(Ehrlich)氏苏木精染液
先将苏木精2g溶于100mL乙醇中,再加冰醋酸10mL,混合后加蒸馏水100mL和100mL甘油,然后加硫酸铝钾(约10g)至饱和,搅拌均匀,倒入瓶中。将瓶口用1层纱布包着小块棉花塞上,放在暗处通风的地方,并经常摇动促进“成熟”,直到液体颜色变为深红色为止。成熟时间约2-4周。若加0.4g碘酸钠可加快成熟。
二、吉姆萨(Giemsa)氏母液
将吉姆萨粉末1g先溶于少量甘油,在研钵内研磨30min以上,至看不见颗粒为止,再将全部(66mL)剩余甘油倒入,于56℃温箱内保温2h。然后再加入甲醇(66mL),搅匀后保存于棕色瓶中。母液配制后放入冰箱可长期保存,一般刚配制的母液染色效果欠佳,保存时间越长越好。
临用时用pH 6.8的磷酸盐缓冲液稀释10倍。
三、瑞(Wright)氏染液
称取瑞氏染料粉末0.1g于研钵内研细后,加入少量甲醇再反复研磨,最后将全部甲醇(总共60mL)加入研匀,染料全部溶解后,将染液保存于棕色瓶内备用。四、醋酸洋红染液
将洋红粉末1g倒入100mL45%醋酸溶液中,边煮边搅拌,煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤,即可使用。也可再加入1%~2%铁明矾水溶液5-10滴,至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。如制作永久标本染色时,可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴,至染色液呈浅蓝色为止。
五、硫堇染液(工作液)
①干液(硫堇):硫堇1g或2g溶于100mL 50%乙醇中,溶解后过滤备用;
②醋酸钠缓冲液:醋酸钠·3H2O 9.7g,巴比妥钠14.7g,溶于500mL蒸馏水中;
③0.1 mol/L盐酸;
按①:②:③=40:28:32比例配成混合液,调pH5.7±0.2,即得硫堇工作液。六、0.02%盾纳斯绿B(Janus Green B)
用0.9%生理盐水溶液配制。
七、甲基绿—派洛宁染液(Unna试剂)
派洛宁0.25 g,甲基绿0.15g,95%乙醇20mL,甘油20mL。将以上试剂混合溶解后用0.5%苯酚水溶液稀释至100 mL。
八、卡诺(Carnoy)氏液
配方1:无水乙醇3份,冰醋酸1份,混匀即可。
配方2:无水乙醇6份,冰醋酸1份,氯仿3份,混匀即可。
九、酸性生理盐水的配制
将10mL 0.1 mol/L盐酸加入300mL生理盐水中,调整其pH值至2.5~3.5
十、迈耶(Mayer)氏蛋白甘油粘贴剂
取一个鸡蛋的蛋清,充分搅拌成泡沫状,然后用粗滤纸或双层纱布过滤,经过数小时即可滤出透明蛋白液。再加入等量的甘油并轻轻摇动,使两者混合。最后加入少许麝香草酚防腐。可保存几个月,半年以后不宜使用。
十一、血管注射标本色剂
红色色剂:银珠3g,明胶15g,蒸馏水100mL;
蓝色色剂:普鲁士蓝1 g,明胶15g,蒸馏水100mL
将银珠和普鲁士蓝分别在研钵内研细,加入温水少许搅和,将明胶和蒸馏水倒入250mL烧杯内,置水浴锅中隔水加热沸腾使明胶完全熔化,过滤后分别倒入盛有银珠和普鲁士蓝的研钵内搅拌均匀。最后分别倒回烧杯中,并置入水浴锅内保温。水温视明胶浓度而定。亦可用代用品淀粉(2份)、甲醛(1份)、甘油(1份)、水(6-8份)和其他红、蓝色染料进行配制。先将淀粉、甲醛和甘油混匀,再加入染料进行搅拌,逐渐加入水调匀。
十二、红细胞稀释液
称取氯化钠0.5g, 硫酸钠2.5 g, 氯化高汞0.25 g,用蒸馏水溶解至100mL.
十三、白细胞稀释液
取冰醋酸1.5mL和1%龙胆紫1 mL,混匀,加蒸馏水至100mL。
十四、碘酒
称取碘2 8和碘化钾1.5g,先加入少量的75%乙醇搅拌,待溶解后再用75%乙醇稀释至100mL。
十五、碘液
碘l g、碘化钾2g,蒸馏水300mL,先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘溶解在碘化钾溶液中,最后用水稀释至1000mL。
十六、肝素溶液
纯的肝素10mg能抗凝100mL血液。如果肝素的纯度不高或已过期,所用的剂量应增大2-3倍。一般可配1%肝素于0.9%生理盐水中使用。
十七、草酸盐抗凝剂
称取草酸铵1.2s、草酸钾0.8 g,加蒸馏水至100mL。为防止霉菌生长,可加40%甲醛溶液1 mL。
十八、柠檬钠抗凝剂
常配成3%-5%蒸馏水溶液。每毫升血加3-5mg即可达到抗凝目的
十九、D—76显影液
称取米吐尔28g,无水亚硫酸钠100g,几奴尼5g,硼砂2g,依次逐个溶解于750mL(50 ℃)的水中,最后加水至1 000 mL
二十、D—72显影液
称取来吐尔3.1g、无水亚硫酸钠45 g,几奴尼12g,无水碳酸钠67.5g,溴化钾1.9g,依次逐个溶解于 750mL(50℃)的水中,最后加水至1000mL。
二十一、SB—1停显液
取28%醋酸48mL稀释至1 000mL。(28%醋酸用98%浓度的冰醋酸3份,加水8份混合而成。
二十二、F—5酸性定影液
称取硫代硫酸钠240g,无水亚硫酸钠15g,醋酸(28%)45 mL、硼酸7.5g,硫酸铝钾15g,依次逐个溶解于 700mL(50℃)的水中,最后加水至1000mL。
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