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反相系统怎么倒正相系统,注意事项,流动相怎么选

  • Insm_167feaaa
    2020/03/23
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • waters e2695本来是反相系统,现在要试一个正相系统,正相色谱柱氨基柱,但是不知道系统怎么倒相,还有有什么注意事项,还有正相流动相怎么选择,需要根据样品的溶解性吗
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  • hujiangtao

    第1楼2020/03/23

    应助达人

    氨基柱可以用反相流动相如乙腈水

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  • dadgoh

    第2楼2020/03/23

    应助达人

    改正相需用异丙醇置换过度。

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  • 我是风儿

    第3楼2020/03/23

    应助达人

    我们氨基柱流动相也是使用乙腈与水

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  • sdlzkw007

    第4楼2020/03/23

    应助达人

    正确使用需要首先咨询一下厂家服务工程师,保证仪器的柱塞杆密封能够耐受正相溶剂(短期还是长期),然后把色谱柱接好,根据初始流动相组成慢慢过渡到100%异丙醇,再转换成正己烷+异丙醇,最后转换成100%正己烷,冲洗系统1小时以上,根据实验初始流动相组成平衡系统,开始进样。异丙醇粘滞阻力大,柱压较高,需要低流速长时间转换,温度不易过高。

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  • hejiahuan

    第5楼2020/03/23

    应助达人

    正反向切换,一般使用色谱级异丙醇过渡,正向使用什么流动相,一般会用到正己烷、氯仿、四氢呋喃等,具体还是要看你检测的是什么物质。

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  • Insm_167feaaa

    第6楼2020/03/23

    我之前用过40乙腈60盐,用完后用高比例水冲洗柱子最后用乙腈保存的,但是后来查资料说,最好不要这么用毁柱子,说加了水柱子使用寿命会很短,实验室一个人还说不要高比例水冲洗柱子用流动相比例冲柱盐,有点后怕怕把柱子用废了,所以想说还是改成正相用吧,最主要还是大极性的有机胺类物质出峰太早而且分离度不太好,所以想试试看正相系统下会不会出峰靠后顺便分离度变好了

    hujiangtao(hujiangtao) 发表:氨基柱可以用反相流动相如乙腈水

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  • Insm_167feaaa

    第7楼2020/03/23

    谢谢,异丙醇过度我倒是知道,主要是液相新手,有些细节不太清楚,例如洗针液柱塞杆液,密封垫等细节,现在按照实验室老员工教的,洗针纯甲醇,洗柱塞杆异丙醇,水冲洗,甲醇过度,异丙醇过度,再上柱子异丙醇小流速过夜。。。

    dadgoh(dadgoh) 发表:改正相需用异丙醇置换过度。

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  • Insm_167feaaa

    第8楼2020/03/23

    你们水里有缓冲盐吗,比例是多少,用完怎么冲柱子,用什么保存啊,你们为啥正相柱反相用呢,也是因为有大极性的物质分离度不好吗

    我是风儿(nphfm2009) 发表:我们氨基柱流动相也是使用乙腈与水

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  • Insm_167feaaa

    第9楼2020/03/23

    准备异丙醇小流速过夜,第二天来了直接用正己烷加点异丙醇做流动相,直接平衡可以吗然后测试一下溶解度然后直接进样可以吗

    sdlzkw007(sdlzkw007) 发表:正确使用需要首先咨询一下厂家服务工程师,保证仪器的柱塞杆密封能够耐受正相溶剂(短期还是长期),然后把色谱柱接好,根据初始流动相组成慢慢过渡到100%异丙醇,再转换成正己烷+异丙醇,最后转换成100%正己烷,冲洗系统1小时以上,根据实验初始流动相组成平衡系统,开始进样。异丙醇粘滞阻力大,柱压较高,需要低流速长时间转换,温度不易过高。

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  • Insm_167feaaa

    第10楼2020/03/23

    一般正相系统进样的流速设成多少呢,1的流速合适吗

    sdlzkw007(sdlzkw007) 发表:正确使用需要首先咨询一下厂家服务工程师,保证仪器的柱塞杆密封能够耐受正相溶剂(短期还是长期),然后把色谱柱接好,根据初始流动相组成慢慢过渡到100%异丙醇,再转换成正己烷+异丙醇,最后转换成100%正己烷,冲洗系统1小时以上,根据实验初始流动相组成平衡系统,开始进样。异丙醇粘滞阻力大,柱压较高,需要低流速长时间转换,温度不易过高。

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