请问单分子成像稀疏激活然后算SPF中心，怎么保证激活的就是单个荧光分子呢？

李晓明老师回答：这个的话其实就是一个难点了。首先标记密度要合适，当然太高的标准密度也很难保证的。另外一个的话，一般我们其实经常会用两个模式，一个是用有荧光开关的荧光蛋白做，这个的话，不是特别的能够保证它的分辨率，就是不是特别能保证他的几乎都是单个荧光分子，但是制药比较容易。然后另外一个策略呢是我用不同的荧光对，比如说我是用 a荧光对去成像，然后b荧光对是可以激发荧光对。我先用一个荧光把 a荧光全部都淬灭，再用b荧光去用很低的亮度去激活某几个荧光分子，这样的话是可以在一定程度上起到低的激活密度的效果的。