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关于GB 8538微生物指标方法验证的求助

Insm_14e4d643

2020/07/11

食品毒素/微生物检测

各位大佬单位最近要进行8538微生物指标的扩项，我在翻阅中国药典后了解到要进行加标，试验菌浓度为10-100cfu/ml。本人并非生物专业，想知道怎么能确定试验菌的浓度，我怎么知道配制的试验符合这浓度要求？

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yayicuo

第1楼2020/07/11

应助达人

采用菌落计数的方法进行验证呀。

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Insm_14e4d643

第2楼2020/07/11

就是取稀释菌液照计数方法做，剩下的菌液冻起来？做完计数以后再取出来拿来做加标？
yayicuo(v3253952) 发表:采用菌落计数的方法进行验证呀。

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四甲基伞形酮

第3楼2020/07/11

应助达人

8538的扩项，用药典的方式去做有点要求超高了。如果实在要用定量加标，两个方法一个是买带证书的质控样品，如果自己配那就用比浊法（一般使用：麦氏浊度法）逐级稀释后同时做平板计数和抽滤，培养后分别计数。简单的方法可以参加能力验证或者测量审核。

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四甲基伞形酮

第4楼2020/07/11

应助达人

冻起来在做，有些菌就死了，冻前冻后肯定有很大差距。
Insm_14e4d643(Insm_14e4d643) 发表:就是取稀释菌液照计数方法做，剩下的菌液冻起来？做完计数以后再取出来拿来做加标？

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Insm_14e4d643

第5楼2020/07/11

之前5750扩项是做了对照试验，当时刚接触还不是很懂，这次翻看药典觉得是不是光做对照不够。像菌落数和大肠容易找到定量质控，我现在找粪肠球菌和铜绿这种就找不到定量标样～所以我也很苦恼
四甲基伞形酮(Ins_46d48ad1) 发表:8538的扩项，用药典的方式去做有点要求超高了。如果实在要用定量加标，两个方法一个是买带证书的质控样品，如果自己配那就用比浊法（一般使用：麦氏浊度法）逐级稀释后同时做平板计数和抽滤，培养后分别计数。简单的方法可以参加能力验证或者测量审核。

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四甲基伞形酮

第6楼2020/07/12

应助达人

铜绿肯定有能力验证。这俩虽然是计数方法但是8537还是定性判定报告。你可以按照自己加标的方法做确认。如果评审老师有疑问在探讨呗。P.a还是做一个能力验证更有说服力。
Insm_14e4d643(Insm_14e4d643) 发表:之前5750扩项是做了对照试验，当时刚接触还不是很懂，这次翻看药典觉得是不是光做对照不够。像菌落数和大肠容易找到定量质控，我现在找粪肠球菌和铜绿这种就找不到定量标样～所以我也很苦恼

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