【分享】高效液相色谱常见故障的判定及解决方法总汇

E、 早出的峰变形
原 因 解决方法
1、样品溶剂选择不恰当 1、a、减少进样体积 b、运用低极性样品溶剂
F、 早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
原 因 解决方法
1、柱外效应 1、a、调整系统连接（使用更短、内径更小的管路） b、使用小体积的流通池
G、 K’增加时，脱尾更严重
原 因 解决方法
1、二级保留效应，反相模式 1、a、加入三乙胺（或碱性样品） b、加入乙酸（或酸性样品） c、加入盐或缓冲剂（或离子化样品） d、更换一支柱子
2、二级保留效应，正相模式 2、a、加入三乙胺（或碱性样品） b、加入乙酸（或酸性样品） c、加入水（或多官能团化合物） d、试用另一种方法
3、二级保留效应，离子对 3、加入三乙胺（或碱性样品）
H、 酸性或碱性化合物的峰拖尾
原 因 解决方法
1、缓冲不合适 1、a、使用浓度50-100mM的缓冲液 b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液
I、 额外的峰
原 因 解决方法
1、样品中有其他组份 1、正常
2、前一次进样的洗脱峰 2、a、增加运行时间或梯度斜率 b、提高流速
3、空位或鬼峰 3、a、检查流动相是否纯净 b、使用流动相作为样品溶剂 c、减少进样体积
J、 保留时间波动
原 因 解决方法
1、温控不当 1、调好柱温
2、流动相组分变化 2、防止变化（蒸发、反应等）
3、色谱柱没有平衡 3、在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱
K、 保留时间不断变化
原 因 解决方法
1、流速变化 1、重新设定流速
2、泵中有气泡 2、从泵中除去气泡
3、流动相选择不恰当 3、a、更换合适的流动相 b、选择合适的混合流动相
L、 基线漂移
原 因 解决方法
1、柱温波动。（即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。） 1、控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器图
2、流动相不均匀。（流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。） 2、使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气，使用中使用氦气。
3、流通池被污染或有气体 3、用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用盐酸）
4、检测器出口阻塞。（高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线） 4、取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。
5、流动相配比不当或流速变化 5、更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。
6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 6、用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 7、检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂
8、样品中有强保留的物质（高K’值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。 8、使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。
9、使用循环溶剂，但检测器未调整。 9、重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相。
10、检测器没有设定在最大吸收波长处。 10、将波长调整至最大吸收波长处
M、 基线噪音（规则的）
原 因 解决方法
1、在流动相、检测器或泵中有空气 1、流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。
2、漏液图 2、见第三部分。检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换泵密封。
3、流动相混合不完全 3、用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂
4、温度影响（柱温过高，检测器未加热） 4、减少差异或加上热交换器
5、在同一条线上有其他电子设备 5、断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正。
6、泵振动 6、在系统中加入脉冲阻尼器
N、 基线噪音（不规则的）
原 因 解决方法
1、 漏液图 1、见第三部分。检查接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换密封。检查流通池是否漏液。
2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成 2、检查流动相的组成。
3、流动相各溶剂不相溶 3、选择互溶的流动相
4、检测器/记录仪电子元件的问题 4、断开检测器和记录仪的电源，检查并更正。
5、系统内有气泡 5、用强极性溶液清洗系统
6、检测器内有气泡 6、清洗检测器，在检测器后面安装背景压力调节器
7、流通池污染（即使是极少的污染物也会产生噪音。） 7、用1N的硝酸（不能用磷酸）清洗流通池
8、检测器灯能量不足 8、更换灯
9、色谱柱填料流失或阻塞 9、更换色谱柱
10、流动相混合不均匀或混合器工作不正常 10、维修或更换混合器，在流动相不走梯度时，建议不使用泵的混合装置
O、 宽峰
原 因 解决方法
1、流动相组成变化 1、重新制备新的流动相
2、流动相流速太低 2、调节流速
3、漏液（特别是在柱子和检测器之间） 3、见section 3。检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪音。如果必要更换密封。
4、检测器设定不正确 4、调整设定
5、柱外效应影响a、柱子过载b、检测器对反应时间或池体积响应过大c、柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大d、记录仪响应时间太长图 5、 a、 小体积进样（例如：10ul而不是100ul）以1：10或1：100的比例稀释样品b、减少响应时间或使用更小的流通池c、 使用内径为0.007-0.01的短管路d、减少响应时间
6、缓冲液浓度太低 6、增加浓度
7、保护柱污染或失效 7、更换保护柱
8、色谱柱污染或失效，塔板数较低 8、更换同样类型的色谱柱。如果新柱子可以提供对称的色谱峰，则用强溶剂冲洗旧柱子。
9、柱入口塌陷 9、打开柱入口，填补塌陷或更换柱子
10、呈现两个或多个未被完全分离的物质的峰 10、选择其它类型的色谱柱以改善分离效果
11、柱温过低 11、提高柱温。除非特殊情况，温度不宜超过75℃

12、检测器时间常数太大 12、使用较小的时间常数
P、 分离度降低
原 因 解决方法
1、流动相污染或变质（引起保留时间变化） 1、重新配置流动相
2、保护柱或分析柱阻塞图 2、去掉保护柱进行分析。如果必要则更换保护柱。如果分析柱阻塞，可进行反冲。如果问题仍然存在色谱柱可能被强保留的污染物损坏，建议使用恰当的再生程序。如果问题仍然存在，进口可能阻塞了，更换入口处的筛板或更换色谱柱。
Q、 所有的峰面积都太小
原 因 解决方法
1、检测器衰减设定过高 1、减少衰减的设定
2、检测器时间常数设定太大 2、设定较小的时间常数
3、进样量太少 3、增大进样量
4、记录仪连接不当 4、使用正确的连接
R、 所有的峰面积都太大
原 因 解决方法
1、检测器衰减设定过低 1、采取较大的衰减
2、进样过多 2、减少进样量
3、记录仪连接不正确 3、正确连接记录仪
以下问题在使用进样阀过程中有可能发生。
A、 手动进样阀，转动不灵
原 因 解决方法
1、转子密封损坏 1、更换或调整转子密封
2、转子太紧 2、调整转子的松紧度
B、 手动进样阀，载样困难
原 因 解决方法
1、进样阀安装不当 1、重新安装
2、定量环阻塞 2、清洗或更换定量环
3、进样器污染 3、清洗或更换进样器
4、管路阻塞 4、清洗或更换管路
C、 自动进样阀，不能转动
原 因 解决方法
1、无压力（或电源） 1、提供恰当的压力（电源）
2、转子太紧 2、调整转子的松紧度
3、进样阀安装不当 3、重新安装
D、 自动进样阀，其它问题
原 因 解决方法
1、阻塞 1、清洗或更换阻塞部件
2、机械故障 2、见随机维修手册
3、控制器故障 3、维修或更换控制器
由气味、景象和声音可以发现的问题
你需要运用你所有的感官去发现液相色谱的问题。你最好养成习惯，每天花上几分钟运用你的感官（除了味觉）来“感觉”你的液相色谱是否存在问题，这样可以帮助你迅速找到问题所在。例如：在你看到漏液之前，你可能首先闻到它的气味。大部分的问题是可以通过眼睛看到。
A、 溶剂的气味
原 因 解决方法
1、漏液 1、见section 3
2、溅出 2、a、检查废液瓶是否已满 b、找到溅出的部位并清洗干净
B、 热气味
原 因 解决方法
1、仪器过热 1、a、检查并调节通风设施 b、检查并调节温度设定 c、关掉仪器，查找维修手册
C、 读数不正常
原 因 解决方法
1、压力不正常 1、见section 2
2、柱温箱问题 2、a、检查并调节设定b、参照用户手册
3、检测器灯失效 3、更换灯
D、 灯警告
原 因 解决方法
1、压力超出极限值 1、a、检查是否阻塞b、检查并调节极限值的设定
2、其它警示灯 2、见用户手册
E、 警告音
原 因 解决方法
1、溶剂泄漏/溅出 1、找到并解决
2、其它警告音 2、见用户手册
F、 刺耳的短音或长音
原 因 解决方法
1、轴承失效 1、见用户手册
2、润滑不够 2、进行恰当的润滑
3、机械故障 3、见用户手册
由气味、景象和声音可以发现的问题
你需要运用你所有的感官去发现液相色谱的问题。你最好养成习惯，每天花上几分钟运用你的感官（除了味觉）来“感觉”你的液相色谱是否存在问题，这样可以帮助你迅速找到问题所在。例如：在你看到漏液之前，你可能首先闻到它的气味。大部分的问题是可以通过眼睛看到。
A、 溶剂的气味
原 因 解决方法
1、漏液 1、见section 3
2、溅出 2、a、检查废液瓶是否已满 b、找到溅出的部位并清洗干净
B、 热气味
原 因 解决方法
1、仪器过热 1、a、检查并调节通风设施 b、检查并调节温度设定 c、关掉仪器，查找维修手册
C、 读数不正常
原 因 解决方法
1、压力不正常 1、见section 2
2、柱温箱问题 2、a、检查并调节设定b、参照用户手册
3、检测器灯失效 3、更换灯
D、 灯警告
原 因 解决方法
1、压力超出极限值 1、a、检查是否阻塞b、检查并调节极限值的设定
2、其它警示灯 2、见用户手册
E、 警告音
原 因 解决方法
1、溶剂泄漏/溅出 1、找到并解决
2、其它警告音 2、见用户手册
F、 刺耳的短音或长音
原 因 解决方法
1、轴承失效 1、见用户手册
2、润滑不够 2、进行恰当的润滑
3、机械故障 3、见用户手册
常见故障及日常维护
下表中列出了液相色谱常见的一些问题，右侧中则列出的日常维护的方法可以减少问题出现的频率。括号中的数字是建议进行维护的时间间隔。用户手册则提供您更多的维护方法。
溶剂瓶
问 题 维 护
1、进口筛板阻塞 1、a、更换（3-6个月）b、过滤流动相，0.5u滤膜
2、气泡 2、流动相脱气
泵
问 题 维 护
1、气泡 1、流动相脱气
2、泵密封损坏 2、更换（3个月）
3、单向阀损坏 3、过滤流动相，运用在线过滤，准备备用单向阀
进样阀
问 题 维 护
1、转子密封损坏 1、a、不要拧的过紧b、过滤样品
色谱柱
问 题 维 护
1、筛板阻塞 1、a、过滤流动相 b、过滤样品 c、运用在线过滤或保护柱
2、柱头塌陷 2、a、避免使用PH>8的流动相（针对大部分硅胶的柱子） b、使用保护柱 c、使用预柱（饱和色谱柱）

检测器
问 题 维 护
1、灯失效，检测器响应降低，噪音增大 1、更换（6个月）或准备备用灯
2、流通池有气泡 2、a、保持流通池清洁 b、池后使用反压抑制器 c、流动相脱气
一般
问 题 维 护
1、腐蚀/摩擦损坏 1、在不使用时保持系统缓冲液的清洁

辛苦了，好资料呀，收藏了，呵呵

辛苦了，回去慢慢看

2007-3-11 4:11:00

弟弟，你也太敬业了吧
但是好的东西一定要保存的
谢谢
辛苦了
注意休息

支持一下，这么全的资料实在不易

谢谢！！收藏了。

应助达人

总结的很好,谢谢了啊!有时间一定好好看看.

总结的相当充分，留下慢慢看，谢谢啦！