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【第十三届原创】】车间沉降菌的测试方法
境随心转
2020/09/27
哈罗德战队
私聊
食品毒素/微生物检测
车间沉降菌的测试方法
采用沉降法,即通过自然沉降原理收集空气中的生物粒子于培养基平皿,经过若干时间在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数,以平板培养皿中的菌落数来判定环境中的活微生物数,并以此来评定车间的洁净度
1
、仪器设备:高压灭菌锅、恒温培养箱、直径
90mm
培养皿
2
、准备操作:将直径
90mm
培养皿进行
121
℃湿热灭菌
20min
,将配置好的大豆酪蛋白琼脂培养基,装入三角瓶进行
121
℃湿热灭菌
20min
,琼脂湿热灭菌后冷却至
45
℃。在无菌室的超净工作台上,将培养基倒入培养皿,一般每个皿大约
15mL
,冷却至室温。
3
、采样方法:将已经制作好的培养皿,根据车间的平面采样点布置图、车间面积和级别进行放置,采样点高度离地
0.8m
~
1.5m
,打开培养皿盖,使培养皿表面暴露
30min
,再将培养皿盖盖上后倒置。
1)
车间面积
2)
级别
3)
平面采样点布置图
4
、培养:全部采样后将培养皿倒置于培养箱中培养。培养温度
35
℃,时间
48h
,每批培养基选定
3
个做对照培养基。
5
、菌落计数:
用肉眼直接计数,标记或在菌落计数器上点计,然后用
5~10
倍放大镜检查,是否有遗漏。若培养皿上有
2
个或
2
个以上的菌落重叠,可分辨时仍以
2
个或
2
个以上菌落计数。
6
、
注意事项
1
)
测试用具要做灭菌处理,以确保测试的可靠性、正确性。
2
)
采取一切措施防止人为对样本的污染。
3
)
对培养基、培养条件及其他参数做详细的记录。
4
)
由于细菌种类繁多,差别甚大,计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察,不要漏计培养皿边缘生长的菌落,须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别,必要时用显微镜鉴别。
5
)
采样前应仔细检查每个培养皿的质量,如发现变质、破损或污染的应剔除。
7
、
测试规则
1
)
测试状态
(
1
)
沉降菌测试前,被测试
车间
的温湿度须达到规定的要求,静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内。
(
2
)
沉降菌测试前,被测试
车间
已经过消毒。
(
3
)
测试状态有静态和动态两种,测试状态的选择必须符合生产要求,并在报告中注明测试状态。
2
)
测试人员
1
测试人员必须穿戴符合环境洁净级别的工作服。
2
静态测试时,室内测试人员不得多于二人。
8
、菌落计数
1
)用肉眼直接计数
,
标记或在菌落计数器上点计
,
然后用
5
~
10
放大镜检查
,
是否遗漏。
2
)若培养皿上有
2
个或
2
个以上的菌落重叠
,
可分辨时仍以
2
个或
2
个以上菌落计数
.
9
、结果计算
1
)用计数方法得出各个培养皿的菌落数。
2
)平均菌落数的计算
平均菌落数
M=
(
M1+M2+M3+
……
.Mn
)
/n
M
:平均菌落数
M1
:
1
号培养皿菌落数
M2
:
2
号培养皿菌落敉
Mn
:
n
号培养皿菌落数
n
:培养皿总数
10
、结果评定:用平均菌落数判定。
1
)车间内的平均菌落数必须低于所选定的评定标准。
2
)若车间内的平均菌落数超过评定标准,则必须对此区域行消毒,然后重新采样两次,测试结果均须合格。
3)评定标准
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