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液相色谱标准曲线回带,低浓度误差很大问题

  • Ins_01de941a
    2020/10/12
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 求教各位老师,在做标准曲线时,R2值挺好的,但是斜率跟截距相似,或者比截距低一个数量级,将低浓度回带到标准曲线时误差很大,或者根本不可能,例如y=10x-100,这个显然在低浓度时不成立。用1/x加权计算标准曲线时,高浓度误差又太大,导致R2值不好。检测过程中低浓度本身重复性还是可以的,或者单纯考虑低浓度范围例如1,5,20,拟合的标准方程也是满足的,加上100,500,1000,就不行了。这种情况要怎么解决呢?直接将标准曲线的低浓度范围舍去吗?但是检测的预期浓度包括这个范围,仪器也确实能测出来。还是可以做分别对应低浓度范围和高浓度范围的两段标准曲线吗?但是做两段感觉没有理论依据呀。谢谢各位老师了,不胜感激!
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  • 通标小菜鸟

    第1楼2020/10/12

    应助达人

    曲线用线性拟合在本底有的情况下低浓度和高浓度两头不能兼顾,在没办法降低本底使得截距变小的前提下可以采用二次拟合,二次拟合曲线不是一条直线,而是具有弯曲度,可以同时兼顾低中高浓度点,曲线各点回读值也是比较准的

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  • hujiangtao

    第2楼2020/10/12

    应助达人

    液质的曲线范围比较窄,有时候可以在目标值附近用单点校正。一般待测物数值在曲线中间处更准一些,液质很多组分确实不适合高浓度,既然楼主的低浓度线性很好,可以考虑曲线范围不要这么大,碰到高浓度样品可以考虑稀释

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  • welewolf

    第3楼2020/10/12

    应助达人

    低浓度下目标物的响应强度怎么样?有可能是目标物的质谱参数没有优化好,导致标准曲线的线性范围比较窄

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  • Ins_01de941a

    第4楼2020/10/12

    还可以,峰形明显,五次重复相对标准偏差也在20%以内。

    welewolf(v2823651) 发表:低浓度下目标物的响应强度怎么样?有可能是目标物的质谱参数没有优化好,导致标准曲线的线性范围比较窄

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  • joufe

    第5楼2020/10/12

    应助达人

    会是这样的,之前实验中出现过线性相关系数4个9,但低浓度样品的采用标曲计算和采用单点标准计算相差较多,所以建议曲线范围不要太大,按照不确定评估的原理,待测物浓度最好处于标准曲线线性的中间,这样误差是最小的,如果样品浓度有高有低,可以高低浓度各做一条曲线,如果觉得麻烦 高浓度的样品稀释一下

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  • 检测老菜鸟

    第6楼2020/10/12

    应助达人

    求教各位老师,在做标准曲线时,R2值挺好的,但是斜率跟截距相似,或者比截距低一个数量级,将低浓度回带到标准曲线时误差很大,或者根本不可能,例如y=10x-100,这个显然在低浓度时不成立。用1/x加权计算标准曲线时,高浓度误差又太大,导致R2值不好。检测过程中低浓度本身重复性还是可以的,或者单纯考虑低浓度范围例如1,5,20,拟合的标准方程也是满足的,加上100,500,1000,就不行了。这种情况要怎么解决呢?

    为啥要带入低浓度进去,你测的样品的浓度是低浓度的吗?如果是低浓度的为啥不用低浓度的曲线呢?

    直接将标准曲线的低浓度范围舍去吗?但是检测的预期浓度包括这个范围,仪器也确实能测出来。还是可以做分别对应低浓度范围和高浓度范围的两段标准曲线吗?但是做两段感觉没有理论依据呀。

    样品包含高浓度和低浓度,那正常是可以做两条曲线的。理论依据可以参考现有国家标准有两条曲线的方法比如voc之类的
    如果你想做一条曲线,那就做好一点,截距给解决一下。曲线不只是线性,截距也是很重要的。

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  • Ins_01de941a

    第7楼2020/10/13

    好的,谢谢哈

    joufe(joufe) 发表:会是这样的,之前实验中出现过线性相关系数4个9,但低浓度样品的采用标曲计算和采用单点标准计算相差较多,所以建议曲线范围不要太大,按照不确定评估的原理,待测物浓度最好处于标准曲线线性的中间,这样误差是最小的,如果样品浓度有高有低,可以高低浓度各做一条曲线,如果觉得麻烦 高浓度的样品稀释一下

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  • Ins_01de941a

    第8楼2020/10/13

    嗯嗯,谢谢啦

    检测老菜鸟(v3295053) 发表:求教各位老师,在做标准曲线时,R2值挺好的,但是斜率跟截距相似,或者比截距低一个数量级,将低浓度回带到标准曲线时误差很大,或者根本不可能,例如y=10x-100,这个显然在低浓度时不成立。用1/x加权计算标准曲线时,高浓度误差又太大,导致R2值不好。检测过程中低浓度本身重复性还是可以的,或者单纯考虑低浓度范围例如1,5,20,拟合的标准方程也是满足的,加上100,500,1000,就不行了。这种情况要怎么解决呢?为啥要带入低浓度进去,你测的样品的浓度是低浓度的吗?如果是低浓度的为啥不用低浓度的曲线呢?直接将标准曲线的低浓度范围舍去吗?但是检测的预期浓度包括这个范围,仪器也确实能测出来。还是可以做分别对应低浓度范围和高浓度范围的两段标准曲线吗?但是做两段感觉没有理论依据呀。样品包含高浓度和低浓度,那正常是可以做两条曲线的。理论依据可以参考现有国家标准有两条曲线的方法比如voc之类的如果你想做一条曲线,那就做好一点,截距给解决一下。曲线不只是线性,截距也是很重要的。

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  • weiqing

    第9楼2020/10/14

    应助达人

    可以把曲线范围收窄一点,跨度不要太大。

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