仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
评论
4
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
色谱
>
液相色谱(LC)
>
帖子详情
【实战宝典】流动相加缓冲液和调节pH值的原则有哪些?
小官人
2021/03/22
私聊
液相色谱(LC)
解答:
(
1
)
在
液相色谱
分析中,选择正确的流动相
pH
值,对可解离化合物的分析十分重要:不恰当的
pH
值可能导致不对称峰、宽峰、分裂峰或肩峰,而尖锐、对称的峰是定量分析中获得低检测限,以及样品好的平行性和保留时间高重现性的前提。在反相色谱中,流动相的
pH
值一般在
2~8
之间(硅胶填料色谱柱
pH
耐受范围),当被测物可解离或样品
pH
值在
2~8
之外时,往往需要在流动相中加入一些改性剂(如酸
/
碱
/
缓冲盐)以改善其峰型或保留。
(
2
)在选择缓冲液
pH
值之前,应先了解被分析物的
p
Ka
,从
HH
公式:
pH = p
Ka
+ log([A-]/[A])
得知,当一种化合物的
p
Ka
= pH
时,其有一半解离;当溶液
pH
值高于或低于
p
Ka
两个单位,化合物
99%
以上以一种形式存在(完全解离或完全未解离),这时有利于获得对称的峰型。因此几乎所有与
pH
相关的保留值变化基本都发生在
p
Ka
±2
个单位的
pH
值范围内,超出这个范围,其保留值随
pH
变化不大。图
5-4
可以看出流动相不同
pH
值,对某些物质保留值和分离度影响很大。
(
3
)综上所述,如果待测组分在反相色谱上保留弱,则需要调节流动相
pH
小于(酸性)
/
大于(碱性)
p
Ka
两个单位,使其绝大部分呈分子状态以增加其在反相色谱柱上保留。若出现组分共流出情况,我们可以根据其各自分子结构特点来调节
pH
增加分离度:如一种物质含有氨基(另一种不含),则可以降低流动相
pH
值,含氨基组分就会发生解离减弱在色谱柱上保留,从而实现分离目的。
图
5-4
不同
pH
值的分离色谱图
1—
对位甲氧基苯胺;
2—
间位苯甲胺;
3—3-
氨基
-
苯甲腈;
4—
对位氯苯胺;
5—
间位氯苯胺;
6—
邻位氯苯胺
领取更多《实战宝典》请进:
http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI
相关话题
1
WATERS 2414求助
2
HPLC指定的系统配置与硬件配置不同
3
【明日开播】“第五届VOCs检测技术与应用”主题网络研讨会
4
求NAD/NADH和NADP/NADPH的方法
5
色谱柱性能评价
近期热榜
赛默飞实验室产品焕新计划有奖调研!
【七月征文】不一YOUNG实验“猿”
报名开启:ICS2024第十三届光谱网络会议!
推荐收藏!盘点中药材及饮片检测解决方案
热门活动
甄选国优仪器,助推设备更新
采购咨询618活动:1000元奖励等你拿
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
【液相色谱之家】老师们,检验报告一般保存多长时间就可以销毁了
讨论
2017/11/01
LZ Agilent 1100DAD检测器,出峰时总是前沿峰?/?
求助
2013/01/23
键合固定相的基本原理Ⅰ
2003/11/10
【求购】关于水产品中硝基呋喃类药物测定的困难!急!
2006/12/12
【资料】关于过柱实验方法和技巧
2007/04/21
应用于离子液体纯度检测的液相色谱,请问使用C18的柱子可以吗,检测器需要哪种型号
求助
2019/06/24
1100 示差检测器基线几万是什么问题
已应助
2023/05/05
液相色谱系统重装分享
原创
2016/05/13
【我们不一YOUNG】+气相色谱出现基线噪声大的原因
分享
2024/07/08
【我们不一YOUNG】+液相色谱使用过程中出现基线飘逸的原因及处置方式
分享
2024/07/08
【我们不一YOUNG】+液相色谱泵压不稳的原因
分享
2024/07/08
【我们不一YOUNG】+液相色谱泵中系统压力升高的原因及处置办法
原创
2024/07/08
【我们不一YOUNG】+液相色谱泵不送液的原因有哪些?
原创
2024/07/08
【我们不一YOUNG】液相色谱压力异常怎么办?
原创
2024/07/07
【我们不一YOUNG】高效液相色谱仪
原创
2024/07/07
【我们不一YOUNG】液相如何改善峰形与提升分离度
原创
2024/07/06
检测报告一定要有判定结果吗?
求助
2024/07/01
气相FID重现性不好原因
求助
2024/07/01
求助安捷伦GC7890B,EPC无响应解决办法
求助
2024/07/01
‘有奖问答’对错题’:用抽样方案(30,0)对产品批进行连续验收,当批不合格品率为1%时,方案的接收概率为73.97%,则平均检出质量为( )。
讨论
2024/07/05
HJ1332便携非甲实际应用问题
讨论
2024/07/01
如何做好体系工作?
分享
2024/07/01
多人主检的报告,检测审核应该怎么签字
求助
2024/07/05
EI源的灯丝镉厂家通用吗?
求助
2024/07/03
【实战宝典】高压梯度洗脱与低压梯度洗脱有什么区别?
分享
2021/03/22
【实战宝典】四氢呋喃和三乙胺在防止色谱峰拖尾方面有什么区别?
分享
2021/03/22
【实战宝典】方法开发中甲醇和乙腈作为流动相有何区别?
分享
2021/03/22
北京京科瑞达科技有限公司刚刚发布了生产计划职位,坐标,速来围观!
原创
2021/03/22
【实战宝典】快速溶剂萃取仪使用后需要进行哪些例行维护?
分享
2021/03/22
【实战宝典】快速溶剂萃取法滤膜的材质如何选择?
分享
2021/03/22
【实战宝典】如何解决提取液体积不一致的问题?
分享
2021/03/22
【实战宝典】快速溶剂萃取在哪些国标中有应用?
分享
2021/03/22
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...