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【实战宝典】方法开发中甲醇和乙腈作为流动相有何区别?
小官人
2021/03/22
私聊
液相色谱(LC)
解答:
(
1
)吸光度:色谱级乙腈在紫外短波长上(
200nm
以下)吸收小。所谓色谱级是除去具有吸收紫外的杂质,在规定的波长上吸光度限制在规格值以内,在紫外检测时产生的噪声小,因此在进行紫外短波长上的高灵敏度分析时乙腈色谱级最适宜。另外,在紫外检测中的梯度基线上,色谱级乙腈产生鬼峰少。
(
2
)压力:乙腈低。从表
5-1
可知,乙腈黏度系数比甲醇小,因此在相同流速和有机相比例条件下,用乙腈流动相系统压力要比甲醇小,同条件下可得到更高的理论塔板值,延长色谱柱的使用寿命
.
(
3
)洗脱能力:乙腈较强。反相色谱中,如果要在相同的时间内分离同一组样品,
100%
甲醇的冲洗强度相当于
89%
的乙腈
/
水或
66%
的四氢呋喃
/
水的冲洗强度。
(
4
)分离(洗脱)的选择性。由于有机溶剂分子的化学性质(甲醇
-
质子给体、乙腈
-
质子受体)不同导致乙腈和甲醇在分离的选择性上不同。在用乙腈类不能获得很好的分离,可以考虑尝试用甲醇作为有机相。
(
5
)峰形:对于某些物质两者峰型差别较大。如水杨酸类化合物用乙腈时拖尾大,用甲醇可抑制;而聚合物类填料与硅胶填料的反相柱相比,更有峰形变宽的倾向(如用聚苯乙烯柱分析芳香族化合物),这在流动相用甲醇时非常显著,而用乙腈则不明显,所以用聚合物类反相用柱时建议采用乙腈。
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