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【实战宝典】导致色谱峰保留时间漂移、柱压波动变大的原因有哪些？

小官人

2021/03/23

液相色谱（LC）

问题描述：使用标准方法做阿莫西林等物质，色谱峰保留时间不断的往后漂移，柱压波动，逐渐变大，这是什么原因导致的？

解答：保留时间的漂移多数时候是由于固定相流失、色谱柱污染等原因导致的色谱柱柱效下降而引起的，具体总结如下：

（1）固定相流失：固定相的稳定性都是有限的，即使在推荐的pH范围内使用，固定相也会慢慢水解，水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定，长链键合相比短链键合相稳定，烷基键合相比氰基键合相稳定。经常清洗色谱柱也会加速色谱柱固定相的水解。其他硅胶基质键合相在水溶液环境中同样也发生水解，如氨基键合相等。

（2）色谱柱污染：色谱柱是非常有效的吸附性过滤器，对于反相色谱柱，样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分，就可能是使保留时间漂移的潜在根源。这些根源通常是样品基质，如食品及生物样品（如血清）中的蛋白脂肪等大分子物质。在此情况下，保留时间漂移的同时或其后会有反压的增加。避免色谱柱污染最简单的方法是防患于未然，可以通过使用固相萃取等前处理方法来尽量去除样品基质的影响。

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