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【实战宝典】氨基柱使用注意事项有哪些？

小官人

2021/03/23

液相色谱（LC）

问题描述：新的氨基柱怎样活化？氨基柱使用很短的时间就报废，这是与柱子没有活化有关吗？

解答：（1）氨基柱其本质属于正相柱，其填料、键合相组成在前文已有详细介绍。使用氨基柱除了采用正相系统作为流动相以外，一般还可采用乙腈-水作为流动相，但是要求乙腈的含量不得低于60%。

（2）使用氨基柱时需要注意以下事项：

a.反相条件下使用时，要特别注意控制流动相pH值范围，pH值越低越有发生水解的危险，最理想的pH范围在pH 3.0~7.0。

b.流动相一定要过滤，一般采用0.22μm的滤膜过滤。如果流动相中还含有缓冲盐类，建议在用分析流动相之前，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。

c.分析结束后，流动相如果含有缓冲盐，用不少于缓冲盐比例的纯水/乙腈冲洗至少20倍柱容量，但要注意纯水比例不宜超过40%（例如用的流动相是20%的缓冲液，则可以用25%比例的纯水将缓冲盐缓慢洗脱出来），再用100%乙腈冲洗至少10倍柱容量，并保存在100%乙腈中。

d.色谱柱如短期不用，可用乙腈保存；长期不用时最好用异丙醇充分置换，最后用正己烷保存。

e.建议使用保护柱，并经常更换保护柱。

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