枳实中辛弗林含量测定

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枳实为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种或甜橙Citrus sinensis Osbeck的干燥幼果。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法，以辛弗林为对照测定其含量。文献报道的常用的含量方法为高效液相色谱法和薄层扫描法。
一、 高效液相色谱法
2005版《中国药典》枳实含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-磷酸二氢钾水溶液（取磷酸二氢钾0.6g，十二烷基磺酸钠1.0g，冰醋酸2ml，加水溶解并稀释至1000ml）（50：50）为流动相，检测波长为275nm。理论板数按辛弗林峰计算应不低于2000。
供试品溶液的制备：取本品中粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，加热回流1.5小时，放冷，再称定重量，用甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，摇匀，通过聚酰胺柱（60～90目，2.5g，内径1.5cm，干法装柱），以水25ml洗脱，收集洗脱液，转移至25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
文献报道的HPLC法，其实验仪器和色谱条件等总结如下：
实验仪器：1100高效液相色谱系统，包括四元梯度泵、手动进样器、二极管阵列检测器、色谱工作站(美国Agilent公司)；岛津LC高效液相色谱仪；美国W aters高效液相色谱仪
色谱条件：①色谱柱为Hypersil ODS C18 (100mm 4.6mm，5μm)，流动相为甲醇-水(含0.1%磷酸、0.1%十二烷基磺酸钠)(43：57)；检测波长为275nm；柱温为40℃；流速为1.0ml/min；②色谱柱Zobax Ex tend-C18 (4.6×250mm，5μm)。流动相为甲醇：水（52：48），内含0.1% 十二烷基磺酸钠和0.5%磷酸；检测波长：275nm：流速：0.9mL/min；柱温：35℃；③色谱柱为Resolve C18不锈钢柱，5μm，4.6×150mm。流动相为甲醇-水（1：1），含3.5%戊烷磺酸钠，0.1%冰醋酸；流速0.8ml/min；检测波长275nm；④色谱柱：4.6mm×200mm内填10μm ypersil C18(大连依利特公司)；流动相：甲醇-水(水中含0.02% H3PO4及0.1%十二烷基磺酸钠, 5：2)；检测波长：224nm；柱温：室温；流量：0.6ml/min。⑤色谱柱：ZORBAX ODS (Agilent 4.6mm×150mm，5μm)；预柱：ZORBAX ODS(Agilent 4.6mm×12.5mm，5μm)；流动相：乙腈-水-磷酸-十二烷基硫酸钠( 32：68：0.1：0.1)，其中每升溶液中加入5 mmol二乙胺改良剂；柱温：35℃；流速：1.0ml/min；检测波长：224nm；
供试品溶液的制备：一般用甲醇超声提取，也有用磷酸超声提取的。

同问，枳实含量测定辛弗林3分钟内就出峰，主要是样品在出峰的时间有个大的杂质峰影响辛弗林的峰啊！换了四个品牌的的柱子都一样。请各位大侠指指招吧！感谢！

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