[新人求助] 正相色谱没有置换会柱压不稳定吗？

应助达人

很大概率是色谱柱损坏了，通常来说正相过渡到反相必须要经过异丙醇（100%），由于粘滞阻力很大，流速设的低一点儿。充分转换成反相才可以用反相色谱法检测。另外需要注意，有些色谱泵柱塞杆密封圈不耐受正相溶剂，需要更换成指定的部件方可进行正相色谱法检测。

置换很重要！！！

感觉柱完了，什么柱，氨基，亲水C18，比C18贵。

应助达人

先检查柱塞垫是否漏液，再看看柱子是否损坏了。

应助达人

6Mpa-12Mpa的波动，这么大的压力波动不会是未脱气造成的，感觉是泵头进空气了。先拆下入口和出口单向阀，用异丙醇超声清洗，用异丙醇高流速排空5min，确保废液没有气泡吧。异丙醇冲洗整个系统，冲洗时先不接柱子。待压力稳定后，再接柱子，用异丙醇过渡。运气好的话还能救回柱子

要通过异丙醇缓慢置换流动相，异丙醇的粘度很大，只能用很低的流速冲，必须完全置换过来才可以，否则，正相柱很容易就废了

应助达人

具体用了什么色谱柱？

有可能会造成色谱柱的损坏。

亲水相互作用色谱（HILIC），应该是亲水柱。

朋友说他拿到柱子后是直接纯乙腈0.2L/min冲洗了一晚，

然后就用甲醇：三氯甲烷=15:85的流动相去跑样品了，不知道是不是柱子坏了。

先置换过来再进行测试看柱子怎么样。实践才能得出适合自己的结论