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【求助】固相萃取问题

  • yitianziyun521
    2007/04/11
  • 私聊

前处理综合讨论


  • 各位大侠,我初次做固相萃取,想请教一些问题:
    1 我用C18柱子,预处理时用甲醇和水,用多少量合适?
    2 做1ml血浆样品,是不是用500mg/ml规格的柱子即可?
    3 因为经费问题,想重复利用柱子,应该怎样处理?是不是即时用甲醇超声即可?
    4 谁有关于固相萃取好的资料,可否推荐一下,初次操作,感觉一片茫然。
    谢谢大家!
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  • 开心的果子

    第1楼2007/04/11

    我也在做固相萃取,不过我做的是农残,预处理过程又叫活化过程,我是先用丙酮再用甲醇和水活化的,重复利用柱子的问题,我一般都是把填料抠出来自己填的,如果想重复利用的话,我想,可能需要对填料进行处理吧,处理完可以检测下看里面的目标物是否被洗干净,下次就可以采用同样的步骤进行重复处理了。资料吗,我这不多你看能否用上吧。以后多交流!!~~
    固相萃取资料
    固相萃取指南

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  • lexmark

    第3楼2007/04/12

    1、各5mL依次活化即可
    2、目前商品化的SPE柱基本分为0.5g和1g两种。一般都可。
    3、做条件可重复使用,可采用超声波,但有的柱子会把柱子上的字超声波下来,污染柱子。做样品就不要重复了吧^_^。柱子也不太贵吧。
    4、SPE的资料论坛多了去,自己能搜一大把何必让大家重复传????

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  • yitianziyun521

    第4楼2007/04/12


    谢谢楼上的啊,因为是新手,好多不懂的啊,还请多多指教啊!
    超声处理是放在甲醇里面超声吗?

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  • yitianziyun521

    第5楼2007/04/12

    还有一个问题啊,100mg/ml 的规格是讲处理1ml样品啊?100mg是什么意思呢?

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  • 我在故我思

    第6楼2007/04/13

    100mg应该是柱子中的填料的质量,一般的柱子体积好像是6mL的。
    重复使用的问题,正如楼上所说的那样,做样品的时候最好还是不要重复使用。

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  • xiaoxiao

    第7楼2007/05/20

    甲醇用2ML活化2-3次,超纯水2ML平衡2次把

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  • xujuanjuan99

    第9楼2007/09/12

    一般来说,用1个柱体积的甲醇活化柱子,基本一次完成就可以了,但如果固定相没有完全浸透的话,应再多活化一次,否则会影响你的回收率,然后再用一个柱体积的调节好PH值的纯水(与你的样品稀释溶剂PH值一致)平衡柱子。
    一般固定相的样品处理量是其质量5%,也就是5mg。
    本人没有实际操作过,从资料上看1ml的血浆可用100mg/1ml的柱子,你自己可以根据实验结果再做合适的调节。

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  • zkydhs

    第10楼2007/11/13

    1 活化采用2mL×3甲醇即可,活化水的pH值最好和样品一致或相近,建议调节活化水的pH
    2 1mL血样,500mg/L的C18柱已足够吸附,500mg为硅胶填料的质量,6mL为柱子体积
    3 采用甲醇超声待溶剂干后,填料极易发生松动,影响回收率的回收,建议不要重复使用。
    4 用水活化后,不能让柱子干涸再上样,否则会柱子流速,因C18是反相柱。
    5 样品过柱完后,不能过分抽干柱子,尤其不宜采用压力泵抽干,那容易发生填料“崩塌”,影响回收率。建议用氮气吹干

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