求助用蒸发光散射测多糖成分

应助达人

有的样品是会出两个峰，原因有时有很多。
但最可能的原因就是异构体导致的。
一般来说在液相分离时，非手性柱在分离样品时不会出现同一化学结构的物质分两个峰。
但是有些物质的对映异构体之间会有很大的性质差异，就导致了在色谱柱中产生了分离。
曾经做过一个杂质，在限度范围内是正常的峰，但是达到一定高的浓度后（在做峰定位时发现的）就会分叉成双峰，这两个峰峰纯度都很高，专属性很强，但是造成这个现象的原因还是没法具体处理，好在不影响正常检测。
至于情况，建议换一根柱子或者改善一下色谱条件试一试，说该峰与溶剂峰重合，是不是出峰有些太早了 。
即使不是双峰，该色谱条件也有待改善。

谢谢。我之前用的是酰胺柱，然后我今天试着换了氨基柱，但是出现了基线不平的情况，基线一直不平，我就一直无法进样

应助达人

楼主详细说说具体的分析条件为好。

具体是哪些待测物质？流动相？色谱柱？

基线不平，有具体的色谱图么？




只能说可能存在异构体问题。。。。。。

我一共试了3根柱子，下面是分别的情况（测的物质是糖类，没有明确指定是哪些，能出来的都测，能肯定的有葡萄糖和甘露糖）
1、酰胺柱
条件：乙腈：水=82：18 ELSD：蒸发管60℃雾化室60℃ 1.6L/min
出现问题：单标（如葡萄糖）出现两个峰，右边是样品峰

2、C18柱
条件：乙腈：水=82：18 ELSD：蒸发管60℃雾化室60℃ 1.6L/min
出现问题：单标没有出现两个峰，但是葡萄糖和甘露糖出峰时间基本一致（都是2.7min左右），且样品只有两个峰（用酰胺柱测有5个峰）

3、氨基柱
条件：乙腈：0.05乙酸铵=85：15ELSD：蒸发管60℃雾化室60℃ 1.6L/min
出现问题：基线不平的问题已经解决，但是不管单标还是样品都没有峰出现（色谱条件是文献方法）

应助达人

氨基柱，使用75%左右的乙腈水做流动相是常见的方法，柱温45度左右可以试试。

请问这个条件x bridge的酰胺柱同样适用吗？