贯叶金丝桃药材中黄酮类成分的含量测定

对照品溶液的制备

精密称取芦丁对照品12.75mg，置于50mL量瓶中，加80%乙醇超声溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为255.0 mg/mL的芦丁对照品贮备溶液。精密吸取2.5mL芦丁对照品贮备溶液，置于50mL量瓶中，加80%乙醇稀释至刻度，摇匀，即得浓度为12.75 mg/mL的芦丁对照品溶液。

供试品溶液的制备

取贯叶金丝桃药材，粉碎，过三号筛。精密称取贯叶金丝桃药材粉末25mg，置于10mL量瓶中，加80%乙醇适量（5mL），超声提取1h，放冷，80%乙醇稀释至刻度，摇匀，0.45 mm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得药材供试品溶液。

称取贯叶连翘提取物粉末5mg于10mL量瓶中，加80%乙醇适量（5mL），超声溶解，用80%乙醇稀释至刻线，摇匀，静置。0.45 mm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得提取物供试品溶液。

对黄酮类物质的含量测定多采用紫外-可见分光光度法，常用芦丁为对照品，经NaNO₂- A1(NO) ₃-NaOH显色后用比色法测定，也有用AlCl₃-醋酸缓冲液(pH4.5)显色测定的。本研究分别从方法的稳定性、准确性方面比较了两种测定方法，结果显示亚硝酸钠法测定值偏高，考虑到贯叶金丝桃药材中含有鞣质、绿原酸、咖啡酸等具有邻二酚羟基结构的非黄酮类成分物质，会发生假阳性反应，因此选择三氯化铝显色法。

分别精密量取供试品溶液及对照品溶液各1.5 mL，置于10mL量瓶中，各精密加0.1mol/L三氯化铝溶液1.0mL，使混匀，再分别加入80%乙醇稀释至刻度，摇匀，室温放置20min，以试剂为空白，按紫外-可见分光光度法规定进行检查，在410nm波长处测定吸收度，以标准曲线法计算，即得。

4 含量测定

制备含量测定药材供试品溶液。按含量测定方法项下操作，在410 nm波长处测定吸收度值，采用标准曲线法按质量百分比计算样品中黄酮类成分的含量，结果见表1。

由表1可知，10批不同产地的贯叶金丝桃药材中黄酮类成分的含量测定结果范围为2.91%~4.17 %。

Tab. 1Contents of flavonoids in Hypericumperforatum fromdifferent sources