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液相色谱(LC)
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请教氨基酸分析中衍生化pH值的问题。
Insm_35707f6d
2022/09/09
私聊
液相色谱(LC)
各位专家好。我们实验室使用venusil的氨基酸测定方法,该方法是将样品水解液氮吹后再用0.1mol/L的盐酸溶解,然后进行衍生化。这样来看,PITC衍生化应该是在酸性条件下进行的。但是在蛋白质分析中的艾德曼降解法,使用PITC和氨基末段残基作用,是在碱性条件下进行的。这个地方就有些矛盾了。是不是我忽略了什么因素?我一个猜测是Venusil方法里衍生化过程中还加入了三乙胺,是不是三乙胺使体系保持了碱性。还有一个现象,测定过程中发现,如果样品的消解液是碱性的,直接做衍生化,测出来的氨基酸内标相比酸性消解液会降低。还请各位专家解惑。谢谢。
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sdlzkw007
第1楼
2022/09/10
应助达人
需要在酸性条件下水解得到氨基酸,才能获得衍生反应的完全。
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