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光谱滴定学技术在油脂酸价测定的应用研究

hhciq

2022/10/24
光谱滴定原创

私聊

食品常规理化分析

光谱滴定学在油脂酸价测定的应用研究

王飞¹^*，吕萍萍²，冷春艳³，李佳琪¹，张悦¹，刘芳¹，

（1.秦皇岛海关技术中心，秦皇岛 066000；

2.绥芬河海关综合技术中心，绥芬河 157399；

3.秦皇岛金海食品工业有限公司，秦皇岛 066000）

摘要

目的研究可见光光谱滴定学技术在油脂酸价测量的可行性。方法选择3种颜色油脂样品、3种不同的指示剂，利用光谱滴定的多个测量参数和人工感官滴定两种方法分别进行油脂中酸价的测定，测定结果进行统计学分析，验证光谱滴定法的可行性、准确性及精密度等指标，并比较测定方法结果的差异性。结果光谱滴定法以酚酞为指示剂测定玉米油和花生油酸价时，其结果与人工感官滴定法无显著差异（P > 0.05），不同参数的检出限0.035 mg/g～0.044 mg/g、定量限0.10mg/g～0.13 mg/g，测量结果与标准物质相符。光谱滴定法以百里香酚酞和碱性蓝6B为指示剂测定玉米油和花生油的滴定终点测量参数还需进一步研究。玉米原油酸价的光谱滴定法与人工滴定方法存在系统误差。结论样品颜色和指示剂选择均影响油脂酸价测定结果。光谱滴定法测定玉米油和花生油中酸价是可行的，可替代人工感官滴定，该方法方便、准确。 VSTT测量参数的算法尚待进一步完善，以适应不同条件下测定的滴定终点的确认。

中图分类号：O657.3 文献标识码：A

食用油是人民群众的必需品，2021年我国食用油产量0.5亿吨，进口1亿吨。食用油的质量与人民健康息息相关^[1]，也是当前关注的焦点。酸价是食用油品质的重要指标，是指植物油中游离脂肪酸的含量，是指中和一克油脂中的游离脂肪酸所需要氢氧化钾的毫克数，以（mg KOH/g）表示^[2,3]。酸价主要反映食品中的油脂酸败的程度，是油脂品质下降，油脂陈旧的指标^[4,5]。油脂在生产、储存运输过程^[6,7]中，如果密封不严、接触空气、光线照射、以及微生物及酶等作用，会导致酸价升高^[8,9]，超过卫生标准。严重时会产生臭气和异味，俗称“哈喇味”^[5]。一般情况下，酸价略有升高不会对人体的健康产生损害。但如发生严重的变质，所产生的醛、酮、酸会破坏脂溶性维生素，并可能对人体的健康产生不利影响^[5,10,11]。为

图1.近年中国食用油进口趋势

了保障油脂的品质和食用安全，故而我国在GB 2716^[12]中规定了油脂的酸价的限量。

油脂酸价分析有多种方法,如滴定法^[8,13]、试纸法^[13]、比色法^[13,14]、色谱法^[13]、近红外光谱法^[15-18]等，并有诸多学者做了研究和改进^[12,19]。国家标准GB 5009.229对于油脂酸价测定的应用较广泛，主要方法有冷溶剂指示剂滴定法、冷溶剂自动电位滴定法及热乙醇指示剂滴定法^[20]。其中冷溶剂指示剂滴定法未明确指定样品颜色的确定方法及范围及对应的检测用指示剂，只是以人的感觉笼统的划分浅颜色采用酚酞、深颜色采用碱性蓝6B，致使指示剂的选择上存在个人理解差异。测定同一样品酸价时，不同指示剂的pH色变点不同，直接影响测量结果。油脂酸价的判定标准中并没有区分不同指示剂测定值的差异，在实际工作中容易产生争议；电位滴定法受有机酸等阴离子干扰电极信号，且容易损坏电极。采用VSTT法测定油脂中酸价有望解决这些难题。

光谱滴定学技术^[21]（可见光光谱滴定技术Visible Spectral Titration Technology，VSTT）是作者历时十年于2018年逐步公布的，其原理是用传感器获取反应过程可见光波长变化的数据^[21]，用VSTT方法的色变曲线公式法计算出色变曲线，曲线上的信号峰为滴定终点的最大变化值，该值与加入试剂体积对应。VSTT法具有滴定终点信号清晰、无接触传感器不干扰化学反应、观察颜色与滴定法一致等优点，有非常广阔的应用前景。目前，在蔬菜^[26]、葡萄酒^[27]样品中得到了验证，尚未有在油脂酸价中的研究报道。以国标^[20]中冷溶剂指示剂滴定法为对照方法，对油脂中酸价进行了VSTT法应用研究，并进行了不同指示剂测定不同油脂样品酸价的差异分析。

1 实验部分

1.1冷溶剂指示剂滴定法与VSTT法的测量原理

样品处理步骤以国标^[20]方法为准，用乙醚-异丙醇混合溶液溶解样品为样液，加入指示剂，以氢氧化钠标准溶液滴定。

滴定过程中，样液中氢离子浓度变化引起指示剂结构的改变，致使样液的吸收光谱发生了变化，当样液的吸收光谱发生迅速变化为到达滴定终点。记录滴定终点氢氧化钠溶液的消耗量，计算试样中酸价的含量。

VSTT^[21] 将用眼睛观察过程用传感器替代，建立的色变滴定曲线同步记录滴定体积和描述颜色变化轨迹，用数字化、图形化的曲线标识颜色变化过程，曲线上的突变峰与吸收光谱有对应关系。

1.2 主要仪器与试剂

光谱滴定仪：SXZ-3型，秦皇岛水熊科技有限公司^[23,24]生产。配备8位自动进样器，光纤光谱仪，400 μm光纤,AST905接口，配准直透镜，数控搅拌器，自动信号处理系统；

反应器：150 mL，靴型，石英材质，L=10.0 mm,秦皇岛水熊科技有限公司生产。

10 mL微量滴定管：最小刻度为0.05 mL。

天平：感量0.001 g。

氢氧化钠标准溶液^[25]：浓度为0.1 mol/L或0.5 mol/L，按照GB/T 601标准要求配制和标定。

乙醚-异丙醇混合液：1+1。用时现配。

酚酞指示剂（传统文献pH8.0～pH10.0,无色→红紫色。VSTT的S_Ja_*-_b_*参数色变点为pH8.4）：称取1 g的酚酞，加入100 mL的95%乙醇并搅拌至完全溶解。

百里香酚酞指示剂（pH9.3～pH10.5，无色→蓝色，VSTT的S_Ja_*-_b_*参数色变点为pH9.3）：称取2 g的百里香酚酞，加入100 mL的95%乙醇并搅拌至完全溶解。

碱性蓝6B指示剂：称取2 g的碱性蓝6B，加入100 mL的95%乙醇并搅拌至完全溶解。

1.3样品信息

样品采用市售玉米油（秦皇岛金海食品工业有限公司，金龙鱼阳光玉米油。）和市售花生油（中粮集团“福临门”小榨炒香压榨一级花生油），玉米原油由秦皇岛金海食品工业有限公司提供。

样品颜色见图2（此处显示的图像颜色与实际颜色可能存在差异，供参考），样品颜色数字化表示见样品测量步骤的量化分级。

图2.样品的颜色

1.4　实验方法

1.4.1人工滴定法测定^[20]

称取试样20 g，加入乙醚-异丙醇混合溶液100 mL溶解，再加入3～4 滴指示剂，以氢氧化钠标准溶液进行人工滴定，在操作人认为的滴定终点颜色，记录滴定终点消耗的氢氧化钠标准溶液的体积，按照1.4.3计算酸价含量。

同时取100 mL乙醚-异丙醇混合溶液做空白试验。

1.4.2VSTT测定

设定光谱滴定仪的测量参数^[26]：光谱范围380 nm～780 nm，△λ5 nm，测量周期150 ms，积分时间150 ms，光程10.0 mm，S_快+S_慢滴定模式，滴定速率0.167 mL/min或者2 μL/步，搅拌速度400转/min，常温。

参照国标^[20]，称取试样20 g，加入乙醚-异丙醇混合溶液100 mL溶解，再加入3～4 滴指示剂，用氢氧化钠标准溶液进行滴定，用VSTT参数的滴定终点峰标记处滴定终点消耗的氢氧化钠标准溶液的体积数，按照1.4.3计算酸价含量。

同时取100 mL乙醚-异丙醇混合溶液做空白试验。

1.4.3　结果计算

油脂中酸价含量按式（1）计算^[20]：

………………（1）

式中：

X₁₄——酸价，单位为毫克每克(mg/g)；

V——试样测定所消耗的标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；

V₀——相应的空白测定所消耗的标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；

c——标准滴定溶液的摩尔浓度，单位为摩尔每升(mol/L)；

56.1——氢氧化钾的摩尔质量，单位为克每摩尔(g/mol)；

m——油脂样品的称样量，单位为克(g)。

2 验证分析

2.1 不同颜色样品、不同指示剂的人工感官滴定和VSTT比对分析

以不同指示剂对3种试样进行酸价的VSTT测定，对测量的数据选择代表性的参数（pH值、明度值L^*、红-绿色品指数值a^*和黄-蓝色品指数值b^*、彩度值C^*_ab、色调角h_ab、色差△E）分析作图如下，再分别经过移动平均处理，比较不同周期的处理效果。同时做人工感官滴定比对分析。

2.1.1 玉米油滴定

玉米油样品颜色为L^*97.3、a^*-4.8、b^*21.2，按L^*a^*b^*颜色量化分级模型（W₁₆₉₀分级模型）分类为L^*10a^*2b^*5，对应的语言描述为：清澈、淡草绿色与象牙黄色的混合色。属习惯描述的浅色系列。以乙醚-异丙醇溶液溶解的样品颜色为L^*98.6，a^*～7.2，b^*27.1，(W₁₆₉₀分级模型：L^*10a^*1b^*5)。

2.1.1.1 酚酞指示剂

图3.玉米油样品pH滴定曲线

图4.玉米油样品VSTT滴定参数L^*

图5.玉米油样品VSTT滴定参数a^*和b^*

图6.玉米油样品VSTT滴定参数C^*_ab

图7.玉米油样品VSTT滴定参数h_ab

从图3～图7可以简单的推断出，在滴定终点附近0.10 mg/g～0.12 mg/g之间，a^*、b^*和、C^*_ab和h_ab有明显的曲线突变趋势。说明现有VSTT测量技术可以对玉米油的酸价使用酚酞指示剂进行测量。

对于采用相交曲线为前提的S_J色变曲线参数是否能区分滴定终点，要进行逐步分析。下面选择VSTT中的色变曲线h_ab系列、S_Ja_*-_b_*系列、S_Ja_*-_C*ab系列、S_Ja_*_-△E系列、S_Jb_*_-C_*_ab系列、S_Jb_*_-h_ab系列、S_Jb_*_-△E系列、S_Ja_*-_hab系列和S_Jh_*_-△E系列作图分析。

图7-1.玉米油样品VSTT滴定参数的h_ab系列

图7-2.玉米油样品VSTT滴定参数的h_ab滴定终点放大图

图7-3.玉米油样品VSTT滴定参数的h_ab

图7-4.玉米油样品VSTT滴定参数的h_ab₅

图7-5.玉米油样品VSTT滴定参数的h_ab₁₀

图7-6.玉米油样品VSTT滴定参数的h_ab₁

图8-1.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*系列

图8-2.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*系列滴定终点放大图

图8-3.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*

图8-4.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*5

图8-5.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*10

图8-6.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*15

图9-1.玉米油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab系列

图9-2.玉米油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab系列放大图

图9-3.玉米油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab

图9-4.玉米油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab5

图9-5.玉米油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab10

图9-6.玉米油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab15

图10-1.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*_-△E系列

图10-2.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*_-△E系列的滴定终点放大图

图10-3.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*_-△E

图10-4.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*_-△E₅

图10-5.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*_-△E₁₀

图10-6.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*_-△E₁₅

图11-1.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-_C*ab系列

图11-2.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-_C*ab系列滴定终点放大图

图11-3.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-_C*ab

图11-4.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-_C*ab5

图11-5.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-_C*ab10

图11-6.玉米油样品VSTT滴定参数的

S_Jb_*_-_C*ab15

图12-1.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-h_ab系列

图12-2.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-h_ab系列滴定终点放大图

图12-3.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-h_ab

图12-4.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-h_ab5

图12-5.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-h_ab10

图12-6.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-h_ab15

图13-1.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-△E系列

图13-2.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-△E系列滴定终点放大图

图13-3.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-△E

图13-4.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-△E₅

图13-5.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-△E₁₀

图13-6.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-△E₁₅

图14-1.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_hab系列

图14-2.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_hab系列滴定终点放大图

图14-3.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_hab

图14-4.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_hab5

图14-5.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_hab₁₀

图14-6.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_hab15

图15-1.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jh_*_-△E系列

图15-2.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jh_*_-△E系列滴定终点放大图

图15-3.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jh_*_-△E

图15-4.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jh_*_-△E₅

图15-5.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jh_*_-△E₁₀

图15-6.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jh_*_-△E₁₅

所有不同参数的每组测量值，均经过格鲁布斯检验剔除异常值（均无异常值），汇总为下表。表中的光谱滴定方法的每一个色变曲线参数的数据均与感官滴定方法的数据进行t检验，根据p值判断二种方法是否有显著性差别^[26,27]，见表1。

表1.玉米油样品VSTT与人工感官滴定结果t检验（酚酞指示剂）

方法		测量值mg/g	平均值（mg/g）	RSD%	p
感官滴定		0.130 0.117 0.126 0.105 0.103 0120 0.122 0.110 0.115	0.116	7.02	----
VSTT	h_ab_上	0.126 0.127 0.125 0.113 0.111 0.110 0.111 0.113	0.117	6.44	0.719
	h_ab5_上	0.124 0.126 0.123 0.112 0.107 0.110 0.109 0.111	0.115	6.68	0.791
	h_ab510_上	0.122 0.124 0.122 0.111 0.107 0.108 0.107 0.109	0.114	6.61	0.425
	h_ab515_上	0.121 0.123 0.120 0.109 0.105 0.107 0.106 0.107	0.112	6.81	0.208
	h_ab_下	0.125 0.126 0.124 0.113 0.111 0.110 0.110 0.112	0.116	6.21	0.887
	h_ab5_下	0.124 0.125 0.123 0.112 0.107 0.110 0.108 0.111	0.115	6.64	0.722
	h_ab510_下	0.121 0.123 0.122 0.111 0.106 0.108 0.106 0.108	0.113	6.66	0.316
	h_ab515_下	0.120 0.122 0.120 0.109 0.104 0.106 0.105 0.107	0.112	6.86	0.150
	S_Ja-b	0.126 0.128 0.126 0.115 0.111 0.112 0.112 0.113	0.118	6.27	0.497
	S_Ja-b5	0.125 0.127 0.124 0.114 0.109 0.111 0.110 0.111	0.116	6.53	0.893
	S_Ja-b10	0.124 0.126 0.123 0.112 0.108 0.109 0.108 0.109	0.115	6.94	0.702
	S_Ja-b15	0.122 0.124 0.121 0.111 0.107 0.108 0.107 0.108	0.113	6.58	0.375
	S_Ja-C	0.127 0.130 0.126 0.116 0.112 0.113 0.112 0.113	0.119	6.47	0.365
	S_Ja-C5	0.126 0.128 0.125 0.115 0.111 0.112 0.111 0.112	0.117	6.35	0.588
	S_Ja-C10	0.125 0.126 0.124 0.114 0.109 0.110 0.109 0.111	0.116	6.58	1.000
	S_Ja-C15	0.123 0.125 0.122 0.113 0.108 0.108 0.108 0.109	0.115	6.59	0.591
	S_Ja-_△_E	0.127 0.128 0.126 0.116 0.112 0.112 0.112 0.116	0.118	6.03	0.334
	S_Ja-_△_E5	0.125 0.126 0.124 0.113 0.109 0.111 0.110 0.112	0.116	6.33	0.926
	S_Ja-_△_E10	0.123 0.125 0.123 0.112 0.108 0.110 0.108 0.110	0.115	6.45	0.681
	S_Ja-_△_E15	0.121 0.123 0.122 0.110 0.106 0.108 0.106 0.108	0.113	6.71	0.300
	S_Jb-C	0.125 0.127 0.124 0.113 0.110 0.111 0.109 0.112	0.116	6.49	0.892
	S_Jb-C5	0.124 0.126 0.123 0.112 0.107 0.110 0.108 0.111	0.115	6.80	0.761
	S_Jb-C10	0.122 0.124 0.122 0.111 0.106 0.108 0.107 0.109	0.113	6.73	0.409
	S_Jb-C15	0.120 0.122 0.120 0.109 0.105 0.107 0.105 0.107	0.112	6.63	0.160
	S_Jb-h	0.127 0.130 0.126 0.116 0.112 0.113 0.112 0.113	0.119	6.47	0.365
	S_Jb-h5	0.125 0.128 0.125 0.115 0.111 0.112 0.111 0.112	0.117	6.23	0.611
	S_Jb-h10	0.125 0.126 0.123 0.114 0.109 0.110 0.109 0.111	0.116	6.47	0.964
	S_Jb-h15	0.123 0.125 0.122 0.113 0.108 0.108 0.108 0.109	0.115	6.59	0.591
	S_Jb-_△_E	0.125 0.129 0.126 0.115 0.111 0.111 0.111 0.113	0.118	6.54	0.569
	S_Jb-_△_E5	0.124 0.127 0.124 0.115 0.109 0.111 0.110 0.111	0.116	6.36	0.890
	S_Jb-_△_E10	0.124 0.126 0.123 0.113 0.108 0.109 0.109 0.109	0.115	6.78	0.761
	S_Jb-_△_E15	0.123 0.124 0.121 0.112 0.107 0.108 0.108 0.108	0.114	6.56	0.448
	S_Jh-_△_E	0.127 0.128 0.126 0.113 0.113 0.111 0.111 0.112	0.118	6.65	0.575
	S_Jh-_△_E5	0.124 0.127 0.124 0.114 0.109 0.110 0.110 0.111	0.116	6.50	0.964
	S_Jh-_△_E10	0.124 0.126 0.122 0.112 0.108 0.109 0.108 0.109	0.115	6.83	0.665
	S_Jh-_△_E15	0.122 0.124 0.121 0.111 0.106 0.107 0.107 0.108	0.113	6.80	0.364

注：人工滴定的试剂空白，以一滴（按50 μL计）；光谱滴定的试剂空白，以40 μL计。

表1中p值均大于0.05，证明感官滴定数据与光谱滴定数据无显著性差异，二种方法是等效的，光谱滴定色变曲线参数中的色变曲线h_ab系列、S_Ja_*-_b_*系列、S_Ja_*-_C*ab系列、S_Ja_*_-△E系列、S_Jb_*_-C_*_ab系列、S_Jb_*_-h_ab系列、S_Jb_*_-△E系列、S_Ja_*-_hab系列和S_Jh_*_-△E系列均可用于替代感官滴定方法进行玉米油样品的滴定。

图16.玉米油样品VSTT的滴定参（酚酞指示剂）柱形图

2.1.1.2 百里香酚酞指示剂

图17.玉米油样品pH滴定曲线

图18.玉米油样品VSTT滴定参数L^*

图19.玉米油样品VSTT滴定参数a^*和b^*

图20.玉米油样品VSTT滴定参数C^*_ab

图21.玉米油样品VSTT滴定参数h_ab

图22.玉米油样品VSTT滴定参数△E

从图17～图22可以简单的推断出，在滴定终点附近0.06 mg/g～0.12 mg/g之间，a^*、b^*和、C^*_ab和h_ab有明显的曲线突变趋势。说明现有测量技术可以对玉米油的酸价使用百里香酚酞指示剂进行测量。

对于采用相交曲线为前提的S_J色变曲线参数是否能区分玉米油样品的百里香酚酞指示剂的酸价滴定终点，要进行逐步分析。下面选择VSTT中的色变曲线h_ab系列、S_Ja_*-_b_*系列、S_Ja_*-_C*ab系列、S_Ja_*_-△E系列、S_Jb_*_-C_*_ab系列、S_Jb_*_-h_ab系列、S_Jb_*_-△E系列和S_Ja_*-_hab系列作图分析。

图23.玉米油样品VSTT滴定参数的h_ab滴定终点放大图

图24.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*系列

图25.玉米油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab系列

图26.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*_-△E系列

图27.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-_C*ab系列

图28.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-h_ab系列

图29.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-△E系列

图30.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_hab系列

图31.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jh_*_-△E系列

感官滴定的测量结果为0.127 mg/g（0.125，0.120，0.137，0.128，0.126，0.130，0.123，RSD%4.31）。在该范围内，进行6次的光谱滴定的相关曲线均有明显的信号表示，但现有的表中的光谱滴定方法尚无法对此给出清晰的信号峰，需要进一步研究发明新的计算公式。

2.1.1.3 碱性兰6B指示剂

图32.玉米油样品pH滴定曲线

图33.玉米油样品VSTT滴定参数L^*

图34.玉米油样品VSTT滴定参数a^*和b^*

图35.玉米油样品VSTT滴定参数C^*_ab

图36.玉米油样品VSTT滴定参数h_ab

图37.玉米油样品VSTT滴定参数△E

从图32～图37可以简单的推断出，在滴定终点附近0.06 mg/g～0.12 mg/g之间，a^*、b^*和、C^*_ab和h_ab有明显的曲线突变趋势。说明现有测量技术可以对玉米油的酸价使用碱性蓝6B指示剂进行测量。

对于采用相交曲线为前提的S_J色变曲线参数是否能区分玉米油样品的碱性蓝6B指示剂的酸价滴定终点，要进行逐步分析。下面选择VSTT中的色变曲线h_ab系列、S_Ja_*-_b_*系列、S_Ja_*-_C*ab系列、S_Ja_*_-△E系列、S_Jb_*_-C_*_ab系列、S_Jb_*_-h_ab系列、S_Jb_*_-△E系列和S_Ja_*-_hab系列作图分析。

图38.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*系列

图39.玉米油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab系列

图40.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*_-△E系列

图41.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-_C*ab系列

图42.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-h_ab系列

图43.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-△E系列

图44.玉米油样品VSTT5滴定参数的S_Ja_*-_hab系列

图45.玉米油样品VSTT滴定参数的S_Jh_*_-△E系列

感官滴定的测量结果为0.087 mg/g（0.086，0.085，0.090，0.082，0.093，0.094，0.079，RSD%6.43）。在该范围内，进行6次的光谱滴定的相关曲线均有明显的信号表示，但现有的表中的光谱滴定方法尚无法对此给出清晰的信号峰，需要进一步发明出新的计算公式。

上述实验结果显示，在选用不同的指示剂（酚酞、百里香酚酞、碱性蓝6B）测定玉米油中酸价时，人工感官法测定值分别为0.116 mg/g、0.127 mg/g、0.087 mg/g，VSTT法各参数测定值分别为0.112～0.119mg/g、无法确定、无法确定。这说明测定同一样品时，指示剂的选择是影响油脂中酸价测定结果的重要因素，这与其他学者研究结论一致^[28-31]。

2.1.2 玉米油原油滴定

玉米油原油样品颜色为L^*81.3、a^*15.4、b^*126.7，按L^*a^*b^*颜色量化分级模型（W₁₆₉₀分级模型）分类为L^*9a^*4b^*13，对应的语言描述为：明亮、淡红色与浓黄色的混合色。属习惯描述的深棕色系列。

2.1.2.1 酚酞指示剂

图46.玉米油原油样品pH滴定曲线

图47.玉米油原油样品VSTT滴定参数L^*

图48.玉米油原油样品VSTT滴定参数a^*和b^*

图49.玉米油原油样品VSTT滴定参数C^*_ab

图50.玉米油原油样品VSTT滴定参数h_ab

图51.玉米油原油样品VSTT滴定参数△E

从图46～图51可以简单的推断出，在滴定终点附近6 mg/g～7 mg/g之间，L^*、a^*、b^*和、C^*_ab、h_ab和△E有明显的曲线突变趋势。说明现有测量技术可以对玉米油原油样品的酸价使用酚酞指示剂进行测量。

对于采用相交曲线为前提的S_J色变曲线参数是否能区分滴定终点，要进行逐步分析。下面选择VSTT中的色变曲线S_Ja_*-_b_*系列、S_Ja_*-_C*ab系列、S_Ja_*_-△E系列、S_Jb_*_-C_*_ab系列、S_Jb_*_-h_ab系列、S_Ja_*-_hab系列和S_Jb_*_-△E系列作图分析。

图52.玉米油原油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*系列

图53.玉米油原油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab系列

图54.玉米油原油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*_-△E系列

图55.玉米油原油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-_C*ab系列

图56.玉米油原油样品VSTT滴定参数的S_Jb_*_-h_ab系列

图57.玉米油原油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_hab系列

图58.玉米油原油样品VSTT滴定参数的S_Jh_*_-△E系列

所有不同参数的每组测量值，均经过格鲁布斯检验剔除异常值（均无异常值），汇总为下表，进行t检验，判断二种方法是否有显著性差别，见表2。

表2.玉米油原油样品VSTT与人工感官滴定结果t检验（酚酞指示剂）

方法		测量值（mg/g）	平均值（mg/g）	RSD%	p
感官滴定		5.70 5.75 5.74 5.72 5.74 5.74 5.76	5.74	0.35	----
VSTT	h_ab_上	6.50 6.55 6.55 6.87 6.94 6.41 6.02 6.38	6.53	4.42	0.000
	h_ab5_上	6.47 6.54 6.51 6.85 6.93 6.39 5.99 6.36	6.50	4.48	0.000
	h_ab510_上	6.45 6.52 6.48 6.82 6.90 6.36 5.97 6.34	6.48	4.46	0.000
	h_ab515_上	6.44 6.48 6.45 6.78 6.86 6.34 5.94 6.31	6.45	4.43	0.000
	h_ab_下	6.49 6.55 6.54 6.86 6.93 6.40 6.01 6.37	6.52	4.43	0.000
	h_ab5_下	6.46 6.53 6.50 6.84 6.92 6.38 5.98 6.35	6.50	4.49	0.000
	h_ab510_下	6.45 6.51 6.47 6.81 6.89 6.35 5.96 6.33	6.47	4.47	0.000
	h_ab515_下	6.43 6.47 6.45 6.77 6.85 6.33 5.94 6.30	6.44	4.43	0.000
	S_Ja-b	6.58 6.68 6.64 6.90 7.02 6.46 6.15 6.43	6.61	4.16	0.000
	S_Ja-b5	6.56 6.66 6.61 6.88 6.99 6.45 6.13 6.41	6.59	4.14	0.000
	S_Ja-b10	6.55 6.62 6.59 6.85 6.96 6.43 6.11 6.39	6.56	4.09	0.000
	S_Ja-b15	6.54 6.58 6.57 6.83 6.95 6.40 6.07 6.36	6.54	4.17	0.000
	S_Ja-C	6.72 6.70 6.73 6.92 7.07 6.52 6.18 6.46	6.66	4.15	0.000
	S_Ja-C5	6.70 6.68 6.71 6.91 7.05 6.50 6.16 6.45	6.65	4.18	0.000
	S_Ja-C10	6.67 6.66 6.68 6.88 7.05 6.47 6.14 6.43	6.62	4.24	0.000
	S_Ja-C15	6.65 6.65 6.65 6.86 7.03 6.45 6.12 6.40	6.60	4.26	0.000
	S_Ja-_△_E	6.57 6.57 6.55 6.89 6.95 6.42 6.03 6.39	6.55	4.46	0.000
	S_Ja-_△_E5	6.48 6.55 6.53 6.86 6.94 6.41 6.01 6.38	6.52	4.44	0.000
	S_Ja-_△_E10	6.47 6.53 6.50 6.83 6.91 6.38 5.98 6.35	6.49	4.43	0.000
	S_Ja-_△_E15	6.45 6.50 6.46 6.79 6.88 6.35 5.96 6.32	6.47	4.40	0.000
	S_Jb-C	6.47 6.55 6.52 6.86 6.94 6.41 5.99 6.38	6.52	4.52	0.000
	S_Jb-C5	6.47 6.54 6.51 6.85 6.92 6.39 5.98 6.36	6.50	4.49	0.000
	S_Jb-C10	6.45 6.51 6.48 6.81 6.89 6.36 5.96 6.34	6.48	4.45	0.000
	S_Jb-C15	6.44 6.48 6.45 6.77 6.86 6.34 5.94 6.30	6.45	4.42	0.000
	S_Jb-h	6.72 6.70 6.73 6.92 7.12 6.52 6.18 6.46	6.67	4.29	0.000
	S_Jb-h5	6.70 6.68 6.71 6.90 7.10 6.50 6.16 6.45	6.65	4.31	0.000
	S_Jb-h10	6.67 6.66 6.68 6.88 7.05 6.47 6.14 6.43	6.62	4.24	0.000
	S_Jb-h15	6.65 6.65 6.65 6.86 7.03 6.45 6.11 6.40	6.60	4.29	0.000
	S_Jb-_△_E	6.71 6.69 6.71 6.90 7.13 6.50 6.18 6.45	6.66	4.32	0.000
	S_Jb-_△_E5	6.69 6.67 6.69 6.89 7.11 6.48 6.15 6.44	6.64	4.38	0.000
	S_Jb-_△_E10	6.66 6.65 6.67 6.87 7.02 6.46 6.13 6.41	6.61	4.20	0.000
	S_Jb-_△_E15	6.64 6.64 6.64 6.85 7.02 6.44 6.10 6.39	6.59	4.31	0.000
	S_Jh-_△_E	6.68 6.68 6.70 6.88 7.13 6.46 6.13 6.43	6.64	4.57	0.000
	S_Jh-_△_E5	6.66 6.65 6.67 6.85 7.11 6.45 6.11 6.36	6.61	4.64	0.000
	S_Jh-_△_E10	6.64 6.62 6.60 6.83 7.05 6.37 6.09 6.35	6.57	4.56	0.000
	S_Jh-_△_E15	6.58 6.57 6.57 6.80 6.91 6.37 6.05 6.33	6.52	4.16	0.000
	S_Ja-h	6.55 6.41 6.55 6.80 6.96 6.42 6.08 6.36	6.52	4.17	0.000
	S_Ja-h5	6.53 6.54 6.77 6.94 6.40 6.06 6.34	6.51	4.41	0.000
	S_Ja-h10	6.51 6.75 6.92 6.38 6.04 6.31	6.48	4.48	0.000
	S_Ja-h15	6.49 6.74 6.89 6.35 6.01 6.27	6.46	4.53	0.000

注：人工滴定的试剂空白，以一滴（按50 μL计）；光谱滴定的试剂空白，以40 μL计。

表2 中t检验数据表明，所有参数注的p值均小于0.05，说明感官滴定方法与VSTT滴定所有色变曲线参数数据均有显著性差异，不可以替代感官滴定方法。值的注意的是，所有参数组的平均值与感官滴定组平均值的差值在0.70 mg/g～0.93 mg/g之间，很明显存在系统误差。

2.1.3 花生油滴定

花生油颜色为L^*92.86、a^*-3.00、b^*26.94，按L^*a^*b^*颜色量化分级模型（W₁₆₉₀分级模型）分类为L^*10a^*2b^*5，对应的语言描述为：清澈、淡草绿色、象牙黄色的混合色，属习惯描述的浅色系列。

2.1.3.1 酚酞指示剂

对测量的数据选择代表性的参数分析作图。

图59.花生油样品VSTT滴定pH变化

图60.花生油样品VSTT滴定参数L^*

图61.花生油样品VSTT滴定参数a^*和b^*

图62.花生油样品VSTT滴定参数C^*_ab

图63-1.花生油样品VSTT滴定参数h_ab

图63-2.花生油样品VSTT滴定参数h_ab放大图

从图59～图63-2可以简单的推断出，在滴定终点附近0.3 mg/g～0.4 mg/g之间，有明显的曲线突变趋势。特别是a^*和b^*曲线有明显的相交。说明现有测量技术可以对花生油的酸价使用酚酞指示剂进行测量。

下面对花生油样品的酸价采用酚酞指示剂的数据，利用光谱滴定学的S_J色变曲线参数进行分析，并与采用人工滴定方法的酸价数据进行比对，以确定合适的色变曲线参数。

图64-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja-b

图64-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja-b放大图

图65-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja-C

图65-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja-C放大图

图66-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja-△E

图66-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja-△E放大图

图67-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Jb-C

图67-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Jb-C放大图

图68-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Jb-h

图68-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Jb-h放大图

图69-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Jb-△E

图69-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Jb-△E放大图

图70-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Jh-△E

图70-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Jh-△E放大图

从图59～图70-2中发现，信噪比较高、图形较好的有h_ab系列外，S_Ja_*-_b_*系列、S_Ja_*-_C*ab系列、S_Ja_*_-△E系列中的S_Ja_*_-△E10和S_Ja_*_-△E15、S_Jb_*_-C_*_ab系列中的S_Jb_*_-C_*_ab₅和S_Jb_*_-C_*_ab₁₀、S_Jb_*_-h_ab系列、S_Jb_*_-△E系列中的S_Jb_*_-△E10和S_Jh_*_-△E5及S_Jh_*_-△E15。将VSTT法测定结果与人工感观滴定结果进行t检验，结果见表3。

表3.花生油样品VSTT与人工感官滴定结果t检验

方法		测量值mg/g	平均值（mg/g）	RSD%	p
感官滴定		0.379 0.385 0.378 0.374 0.381 0.376 0.379	0.379	0.93	----
VSTT	h_ab_上	0.384 0.377 0.378 0.378 0.378 0.376 0.378 0.383	0.379	0.75	0.602
	h_ab5_上	0.381 0.376 0.371 0.376 0.376 0.375 0.377 0.382	0.377	0.90	0.940
	h_ab510_上	0.379 0.374 0.371 0.374 0.373 0.372 0.375 0.379	0.375	0.82	0.658
	h_ab515_上	0.377 0.373 0.370 0.372 0.371 0.371 0.374 0.377	0.373	0.69	0.495
	h_ab_下	0.383 0.376 0.378 0.377 0.377 0.375 0.378 0.382	0.378	0.74	0.565
	h_ab5_下	0.381 0.376 0.371 0.375 0.375 0.374 0.376 0.381	0.376	0.90	0.909
	h_ab510_下	0.378 0.374 0.370 0.374 0.372 0.372 0.375 0.379	0.374	0.81	0.709
	h_ab515_下	0.376 0.373 0.370 0.371 0.371 0.371 0.373 0.376	0.372	0.68	0.299
	S_Ja-b	0.384 0.384 0.383 0.383 0.383 0.382 0.382	0.383	0.29	0.002
	S_Ja-b5	0.383 0.382 0.382 0.382 0.381 0.380 0.381 0.384	0.382	0.37	0.015
	S_Ja-b10	0.382 0.381 0.380 0.380 0.379 0.378 0.380 0.383	0.380	0.42	0.056
	S_Ja-b15	0.381 0.379 0.379 0.379 0.378 0.377 0.378 0.382	0.379	0.40	0.065
	S_Ja-C	0.388 0.387 0.386 0.385 0.384 0.386 0.384 0.388	0.386	0.34	0.057
	S_Ja-C5	0.387 0.385 0.384 0.384 0.383 0.383 0.383 0.387	0.385	0.43	0.075
	S_Ja-C10	0.385 0.383 0.383 0.383 0.383 0.383 0.382 0.385	0.383	0.33	0.006
	S_Ja-C15	0.384 0.381 0.382 0.382 0.382 0.381 0.381 0.384	0.382	0.33	0.015
	S_Ja-_△_E	0.379 0.382 0.380 0.380 0.383 0.380 0.384	0.382	0.85	0.145
	S_Ja-_△_E5	0.383 0.377 0.375 0.377 0.378 0.376 0.378 0.383	0.378	0.79	0.686
	S_Ja-_△_E10	0.380 0.376 0.374 0.375 0.375 0.375 0.376 0.380	0.376	0.69	0.299
	S_Ja-_△_E15	0.378 0.374 0.371 0.373 0.372 0.372 0.375 0.378	0.374	0.68	0.495
	S_Jb-C	0.382 0.378 0.376 0.377 0.377 0.375 0.377 0.383	0.378	0.71	0.585
	S_Jb-C5	0.380 0.376 0.371 0.375 0.375 0.374 0.376 0.382	0.376	0.85	0.933
	S_Jb-C10	0.378 0.374 0.370 0.373 0.372 0.372 0.375 0.379	0.374	0.85	0.728
	S_Jb-C15	0.377 0.373 0.370 0.371 0.371 0.371 0.373 0.377	0.373	0.74	0.525
	S_Jb-h	0.388 0.384 0.386 0.385 0.386 0.386 0.384 0.388	0.386	0.34	0.049
	S_Jb-h5	0.386 0.385 0.384 0.384 0.383 0.383 0.383 0.387	0.385	0.40	0.041
	S_Jb-h10	0.385 0.383 0.383 0.383 0.383 0.382 0.382 0.385	0.383	0.35	0.010
	S_Jb-h15	0.384 0.381 0.382 0.382 0.382 0.381 0.381 0.384	0.382	0.33	0.015
	S_Jb-_△_E	0.386 0.386 0.384 0.385 0.384 0.384 0.384 0.387	0.385	0.34	0.011
	S_Jb-_△_E5	0.386 0.383 0.384 0.384 0.383 0.382 0.382 0.386	0.384	0.41	0.053
	S_Jb-_△_E10	0.384 0.382 0.382 0.383 0.382 0.382 0.382	0.382	0.31	0.002
	S_Jb-_△_E15	0.382 0.381 0.381 0.381 0.380 0.380 0.380 0.384	0.381	0.34	0.024
	S_Jh-_△_E	0.385 0.383 0.379 0.384 0.382 0.382 0.384 0.386	0.383	0.56	0.227
	S_Jh-_△_E5	0.385 0.383 0.382 0.381 0.382 0.381 0.383 0.383	0.382	0.35	0.019
	S_Jh-_△_E10	0.382 0.381 0.380 0.380 0.380 0.379 0.380 0.383	0.381	0.36	0.019
	S_Jh-_△_E15	0.381 0.380 0.379 0.379 0.379 0.378 0.379 0.382	0.380	0.33	0.019

注：人工滴定的试剂空白，以一滴（按50 μL计）；光谱滴定的试剂空白，以40 μL计。

图71.花生油样品VSTT滴定参数（酚酞指示剂）柱形图

上述表3及图71可见，各参数的测量值与人工滴定值进行t检验，参数h_ab上、h_ab5上、h_ab510上、h_ab515上、h_ab下、h_ab5下、h_ab510下、h_ab515下、S_Ja_*_-△E₅、S_Ja_*_-△E₁₀、S_Ja_*_-△E₁₅、S_Jb_*_-C_*_ab、S_Jb_*_-C_*_ab₅、S_Jb_*_-C_*_ab1₀、S_Jb_*_-C_*_ab₁₅和S_Jh_*_-△E的p值均大于0.05，说明与感官滴定值无显著性差异，可以替代感官滴定用于花生油酸价的滴定。

对于采用酚酞为指示剂及进行花生油酸价的检验，VSTT的色变曲线参数h_ab系列、S_Ja_*-_b_*系列、S_Ja_*-_C*ab系列、S_Ja_*_-△E系列、S_Jb_*_-C_*_ab系列、S_Jb_*_-h_ab系列、S_Jb_*_-△E系列和S_Jh_*_-△E系列均可以用于花生油酸价的测量分析。

2.1.3.2 百里香酚酞指示剂

采用光谱滴定仪自带的慢速滴定模式，进行滴定。对测量的数据选择代表性的参数分析作图。

图72.花生油样品pH滴定曲线

图73.花生油样品VSTT滴定参数L^*

图74.花生油样品VSTT滴定参数a^*和b^*

图75.花生油样品VSTT滴定参数C^*_ab

图76.花生油样品VSTT滴定参数h_ab

从图72～图76可以简单的推断出，在滴定终点附近0.3 mg/g～0.5 mg/g之间，各滴定参数曲线有明显的突变趋势。说明现有测量技术可以对花生油的酸价使用酚酞指示剂进行测量。只是a^*和b^*说明曲线没有相交，对于采用相交曲线为前提的S_J色变曲线参数是否能区分滴定终点，要进行逐步分析。

下面选择VSTT中比较典型的色变曲线S_Ja_*-_b_*系列、S_Ja_*-_C*ab系列、S_Ja_*-_hab系列和S_Ja_*-_△E系列进行作图分析。

图77-1.花生油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*系列

图77-2.花生油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*

图78-1.花生油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*5

图78-2.花生油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*10

图79-1.花生油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*15

图79-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab系列

图80-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab

图80-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab5

图81-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab10

图81-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab15

图82-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_hab系列

图82-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_hab

图83-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_hab5

图83-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_hab10

图84-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_hab15

图84-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_△E系列

图85-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_△E

图85-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_△E5

图86-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_△E10

图86-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_△E15

通过对VSTT中比较典型的色变曲线S_Ja_*-_b_*系列、S_Ja_*-_C*ab系列、S_Ja_*-_hab系列和S_Ja_*-_△E系列进行作图分析，均未发现有明确的色变点突变峰。因此，以目前的VSTT技术可以测量出变化趋势，但尚不足以分析出花生油酸价的滴定终点的具体位置，需要进一步完善色变曲线类型以适应不同滴定类型。

2.1.3.3 碱性兰6B指示剂

对测量的数据选择代表性的参数分析作图。

图87.花生油样品pH滴定曲线

图88.花生油样品VSTT滴定参数L^*

图89.花生油样品VSTT滴定参数a^*和b^*

图90.花生油样品VSTT滴定参数C^*_ab

图91.花生油样品VSTT滴定参数h_ab

从图87～图91可以简单的推断出，在滴定终点附近0.3 mg/g～0.5 mg/g之间，a^*、b^*和C^*_ab有明显的曲线突变趋势,但前面均有明显变化的峰，可以采用区域限制法加以区分。主要指标a^*和b^*曲线没有相交，对于采用相交曲线为前提的S_J色变曲线参数是否能区分滴定终点，要进行逐步分析。

下面选择VSTT中比较典型的色变曲线S_Ja_*-_b_*系列、S_Ja_*-_C*ab系列、S_Ja_*-_hab系列和S_Ja_*-_△E系列进行作图分析。

图92.花生油样品VSTT滴定参数的S_Ja_*-_b_*系列

图93.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_C*ab系列

图94.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_hab系列

图95.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_△E系列

通过对VSTT中比较典型的色变曲线S_Ja_*-_b_*系列、S_Ja_*-_C*ab系列、S_Ja_*-_hab系列和S_Ja_*-_△E系列进行作图分析，S_Ja_*-_b_*系列、S_Ja_*-_C*ab系列、S_Ja_*-_hab系列均未发现有明确的色变点突变峰,S_Ja_*-_△E系列有明显色变峰，但峰型不是太好，细分如下图所示。

图95-1.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_△E

图95-2.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_△E5

图95-3.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_△E10

图95-4.花生油样品VSTT滴定参数S_Ja_*-_△E15

图95-1～图95-4可以看出，图形虽然不是很丰满，以最峰高为滴定终点峰，其对应的酸价值为滴定终点的酸价值，见下表4，并与人工滴定值进行比对。

表4.花生油样品VSTT与人工感官滴定结果t检验（碱性兰6B指示剂）

方法		测量值mg/g	平均值（mg/g）	RSD%	p
感官滴定		0.422 0.384 0.395 0.409 0.374 0.367 0.354	0.386	6.19	---
VSTT	S_Ja_-_△_E*	0.379 0.386 0.380 0.389 0.383 0.373 0.384 0.381 0.379	0.382	1.37	0.730
	S_Ja_-_△_E5*	0.378 0.386 0.380 0.388 0.383 0.373 0.382 0.381 0.377	0.381	1.32	0.702
	S_Ja_-_△_E10*	0.378 0.383 0.377 0.385 0.382 0.371 0.380 0.381 0.377	0.379	1.23	0.548
	S_Ja_-_△_E15*	0.378 0.385 0.375 0.383 0.381 0.367 0.377 0.379 0.373	0.378	1.58	0.527

上述表4可见，对VSTT参数的测量值与人工滴定值进行t检验，p值均

大于0.05，说明与感官滴定值无显著性差异，可以替代感官滴定用于花生油酸价的滴定。对于采用碱性蓝6B为指示剂及进行花生油酸价的检验，S_Ja_*-_△E系列可以用于花生油酸价的测量分析。

2.1.4 植物油标准物质滴定

采用VSTT方法，已酚酞为指示剂，对国家粮食和物资储备局科学研究院的编号为QJTZK-008的植物油中酸价分析质控样品进行测量，结果见表5。

表5.VSTT方法测量标准物质（扩展不确定度（k=2）0.05）

标准值（mg/g）	VSTT方法
标准值（mg/g）	参数	测量值（mg/g）	平均值（mg/g）	测量RSD%	标准RSD%
0.77	S_Ja-△E*	0.818 0.800	0.809	2.2	≤15
0.77	S_Jb-Cab	0.814 0.798	0.806	2.0	≤15

表5数据说明，VSTT的参数S_Ja_*-△_E和S_Jb_*-_C_*_ab的测量值均在标准物质的定值范围内，测量精密度满足国家标准要求，VSTT法（酚酞指示剂）测定油脂中酸价准确、可靠。

2.1.5 浅色玉米油VSTT的方法检出限

VSTT法的突变峰-结构定律表明，VSTT的坐标曲线参数的突变峰只与呈色物质的结构变化有关，与呈色物质的浓度无关，这是VSTT技术区别于其它测量技术的主要特征。VSTT信号峰是试剂加入中引起物质结构变化对光谱的影响，信号峰峰高与试剂加入量没有直接的数学关系。

国标GB 5009.229中均没有给出明确的检出限。本案例参考HJ 168^[32]，采用浅色玉米油为基质样品，乙醚-异丙醇溶液稀释样品基质样液，以酚酞为指示剂，在选定参数的色变滴定曲线上信号峰有明显大于背景噪音3倍以上的浓度水平，进行测定重复平行试验，测定结果按的滴定方法的检出限计算公式，计算食用油脂的酸价检出限。

方法检出限计算公式^[32]：

MDL=t_(n-1，0.99)×S……（2）

式中：MDL——方法检出限；

n——样品的平行测定次数；

t——自由度为n-1，置信度为99%时的t分布值（单侧）；

S——n次平行测定的标准偏差。

图96.用于计算MDL值的样品的不同参数含量分布图

表6和图96中看出，用于测量MDL的样品含量主要分布在0.126 mg/g～0.28 mg/g之间,并计算出的不同参数的MDL。

图97.不同参数的MDL分布图

从图97中看出，MDL主要分布在0.032 mg/g～0.054 mg/g之间。

表6.VSTT色变曲线参数测量玉米油酸价的最低检出限（mg/g）

序

h_上

h₅_上

h₁₀_上

h₁₅_上

h_下

h₅_下

h₁₀_下

h₁₅_下

S_Ja-b

S_Ja-b5

S_Ja-b10

S_Ja-b15

S_Ja-C

S_Ja-C5

S_Ja-C10

S_Ja-C15

S_Ja-h

S_Ja-h5

S_Ja-h10

S_Ja-h15

S_Ja-_△_E

S_Ja-_△_E5

S_Ja-_△_E10

S_Ja-_△_E15

S_Jb-C

S_Jb-C5

S_Jb-C10

S_Jb-C15

S_Jb-h

S_Jb-h5

S_Jb-h10

S_Jb-h15

S_Jb-_△_E

S_Jb-_△_E5

S_Jb-_△_E10

S_Jb-_△_E15

S_Jh-_△_E

S_Jh-_△_E5

S_Jh-_△_E10

S_Jh-_△_E15

0.228

0.217

0.194

0.171

0.240

0.223

0.200

0.177

0.234

0.217

0.200

0.177

0.223

0.217

0.200

0.177

0.217

0.211

0.194

0.171

0.251

0.234

0.211

0.194

0.217

0.206

0.194

0.171

0.240

0.228

0.211

0.188

0.234

0.206

0.188

0.166

0.223

0.217

0.194

0.171

0.240

0.223

0.211

0.188

0.246

0.228

0.217

0.194

0.240

0.223

0.206

0.188

0.240

0.228

0.206

0.188

0.234

0.223

0.188

0.274

0.240

0.228

0.211

0.228

0.217

0.200

0.183

0.234

0.240

0.228

0.211

0.234

0.217

0.200

0.183

0.234

0.223

0.206

0.188

0.223

0.211

0.194

0.177

0.228

0.217

0.200

0.183

0.223

0.211

0.194

0.177

0.223

0.211

0.194

0.177

0.223

0.211

0.200

0.171

0.240

0.228

0.211

0.194

0.217

0.206

0.188

0.171

0.257

0.223

0.211

0.194

0.217

0.206

0.188

0.166

0.223

0.211

0.194

0.171

0.211

0.183

0.171

0.154

0.194

0.188

0.177

0.160

0.194

0.183

0.171

0.154

0.194

0.183

0.171

0.154

0.177

0.160

0.166

0.149

0.228

0.194

0.188

0.171

0.188

0.177

0.160

0.149

0.228

0.206

0.188

0.171

0.188

0.177

0.160

0.143

0.183

0.166

0.149

0.240

0.200

0.183

0.160

0.217

0.206

0.188

0.166

0.217

0.200

0.183

0.160

0.217

0.206

0.183

0.166

0.177

0.154

0.137

0.183

0.234

0.217

0.194

0.177

0.211

0.200

0.177

0.160

0.223

0.211

0.200

0.183

0.211

0.194

0.177

0.154

0.206

0.200

0.183

0.160

0.234

0.228

0.206

0.183

0.246

0.234

0.211

0.188

0.240

0.228

0.206

0.188

0.246

0.228

0.206

0.188

0.228

0.206

0.183

0.251

0.246

0.223

0.200

0.240

0.228

0.200

0.183

0.251

0.240

0.223

0.200

0.240

0.223

0.200

0.177

0.240

0.228

0.206

0.183

0.223

0.206

0.183

0.240

0.228

0.211

0.188

0.240

0.223

0.206

0.183

0.240

0.223

0.206

0.183

0.234

0.217

0.200

0.160

0.280

0.240

0.223

0.206

0.234

0.217

0.200

0.177

0.246

0.234

0.223

0.206

0.234

0.217

0.194

0.177

0.234

0.223

0.200

0.183

0.211

0.188

0.166

0.228

0.217

0.194

0.171

0.223

0.211

0.188

0.166

0.228

0.211

0.188

0.166

0.223

0.206

0.183

0.154

0.240

0.228

0.206

0.183

0.223

0.206

0.183

0.160

0.234

0.217

0.200

0.177

0.223

0.206

0.183

0.160

0.217

0.211

0.188

0.166

0.211

0.188

0.177

0.160

0.223

0.194

0.183

0.166

0.223

0.188

0.177

0.160

0.223

0.188

0.177

0.160

0.188

0.171

0.149

0.126

0.217

0.200

0.194

0.177

0.194

0.183

0.166

0.154

0.234

0.217

0.194

0.177

0.194

0.177

0.166

0.154

0.211

0.188

0.171

0.160

0.206

0.200

0.177

0.160

0.217

0.206

0.183

0.166

0.211

0.200

0.183

0.160

0.211

0.200

0.183

0.160

0.200

0.177

0.171

0.149

0.228

0.211

0.194

0.171

0.211

0.200

0.177

0.160

0.217

0.206

0.194

0.171

0.206

0.194

0.171

0.154

0.234

0.177

0.188

0.160

0.206

0.188

0.171

0.149

0.211

0.194

0.177

0.154

0.206

0.194

0.171

0.154

0.206

0.194

0.171

0.154

0.206

0.166

0.154

0.137

0.217

0.206

0.188

0.171

0.206

0.188

0.171

0.149

0.211

0.200

0.188

0.177

0.206

0.188

0.166

0.143

0.200

0.177

0.171

0.149

0.211

0.194

0.177

0.154

0.211

0.200

0.183

0.160

0.206

0.194

0.171

0.154

0.206

0.171

0.177

0.154

0.183

0.194

0.177

0.154

0.223

0.206

0.183

0.166

0.206

0.166

0.149

0.137

0.211

0.206

0.183

0.160

0.194

0.188

0.166

0.149

0.183

0.171

0.160

0.137

0.200

0.183

0.160

0.143

0.217

0.188

0.166

0.149

0.206

0.177

0.160

0.137

0.211

0.194

0.160

0.143

0.200

0.160

0.154

0.137

0.223

0.206

0.177

0.160

0.206

0.188

0.171

0.149

0.217

0.200

0.183

0.166

0.194

0.177

0.149

0.131

0.240

0.194

0.177

0.154

0.194

0.177

0.166

0.143

0.206

0.183

0.171

0.149

0.200

0.177

0.166

0.143

0.200

0.177

0.166

0.149

0.188

0.171

0.160

0.143

0.211

0.188

0.183

0.160

0.188

0.171

0.160

0.143

0.206

0.200

0.177

0.160

0.194

0.171

0.154

0.143

0.194

0.177

0.160

0.143

0.188

0.177

0.160

0.143

0.200

0.183

0.166

0.149

0.200

0.177

0.160

0.143

0.200

0.177

0.166

0.143

0.194

0.177

0.160

0.143

0.223

0.194

0.177

0.154

0.188

0.177

0.160

0.143

0.206

0.194

0.177

0.160

0.194

0.171

0.154

0.137

0.188

0.177

0.160

0.143

平均

0.215

0.200

0.183

0.162

0.222

0.206

0.188

0.168

0.217

0.200

0.183

0.163

0.218

0.201

0.183

0.164

0.205

0.188

0.173

0.156

0.236

0.216

0.199

0.180

0.210

0.195

0.177

0.159

0.228

0.215

0.199

0.180

0.211

0.194

0.174

0.156

0.214

0.197

0.182

0.161

MDL

0.034

0.037

0.035

0.033

0.034

0.037

0.035

0.033

0.034

0.038

0.035

0.034

0.041

0.033

0.043

0.054

0.045

0.041

0.044

0.040

0.036

0.038

0.035

0.039

0.036

0.032

0.035

0.032

0.036

0.039

0.037

0.036

0.033

0.044

0.043

0.035

0.034

LOD

0.101

0.112

0.106

0.098

0.103

0.112

0.106

0.098

0.101

0.114

0.105

0.106

0.101

0.122

0.100

0.099

0.130

0.163

0.135

0.122

0.131

0.121

0.109

0.113

0.105

0.118

0.107

0.095

0.105

0.097

0.109

0.107

0.116

0.111

0.109

0.099

0.132

0.128

0.105

0.101

图98、食用油脂酸价测量参数S_Ja*-△E检出限

图99.食用油脂酸价测量参数S_Jb*-C*ab检出限

2.1.6 浅色玉米油方法定量限（LOQ）

图98～图99中VSTT参数S_Ja*-△E和S_Jb*-C*ab的色变曲线的信号值与基线值之间的分离程度非常好，其信号分辨的可信性好，S_Ja*-△E的MDL为0.044 mg/g、S_Jb_*-_C_*_ab的MDL为0.035 mg/g。本案例采用约3倍的检出限为定量限^[33]，即S_Ja*-△E的LOQ为0.13 mg/g 、S_Jb*-C*ab的LOQ为0.10 mg/g。

3　结论

通过前述实验数据分析，对不同油脂中酸价测定的一系列验证及比对实验的结果进行分析，本文总结了以下结论：

1. VSTT方法可以用于测定油脂酸价。可测定样品数据准确、可靠，其方法学参数符合国家标准要求，与国标的人工方法相比没有差异，可以提供方法检出限（MDL）及方法定量限（LOQ），实现数字化测量和量值溯源，有着明显的优势。

2. 验证了不同指示剂对测量结果的影响。发现相同样品采用不同指示剂的滴定结果存在误差，需要对国标方法进一步完善。

3.VSTT方法可精确量化油脂样品的颜色，可解决国标中因人为确认样品颜色的差异误选滴定指示剂，而造成检测结果争议的难题。

4.现有光谱滴定学的色变曲线算法尚待进一步完善，以适应不同样品需求。

可见光光谱滴定技术（VSTT）是首次由我国学者提出的滴定分析理论，用动态反应的可见光全谱变化，表示为滴定曲线的色变曲线，用以替代人工滴定，可实现以颜色变化为滴定终点的测量手段的自动化、数字化，是滴定分析领域的新突破。VSTT方法的色变曲线清晰、终点峰值明显，替代人眼观察、大脑判断、手工记录的繁琐、笨重、原始方式，克服人工感官滴定方法的色评价条件影响、人眼色观察阈值不一致、语言描述理解困难和无法量值溯源的痼疾，实现沿袭历史习惯，可溯源的自动化滴定方式替代。

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