大豆蛋白豆皮中诱惑红的检测分析
背景
诱惑红,食用合成红色色素,食品中加入诱惑红会使样品色泽更好,但当前食品中乱用色素的现象较为普遍,食品安全国家标准食品添加剂使用标准GB2760-2014对食品中诱惑红的使用量进行了规定。
适用范围
参照GB5009.35-2016 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定方法,进行大豆蛋白豆皮中诱惑红的测定。
实验步骤
1. 试剂与仪器
甲醇:色谱纯
正己烷:色谱纯
无水乙醇-氨水-水溶液:7:2:1体积比
诱惑红标准品
离心机
涡旋混合器
高效液相色谱仪(紫外检测器)
2.样品制备
2. 1提取
取1.00 g样品,加入10 mL正己烷于涡旋混合器混匀,离心,除去正己烷层,加入25 mL无水乙醇氨水水溶液(7+2+1)超声提取20 min,离心,取上层液,于40 ℃旋转蒸发至5 mL左右,调pH至6,待净化。
2.2净化
固相萃取小柱:SelectCore WAX 150 mg/6 mL
上样:5 mL甲醇,5 mL水活化小柱,上样液,5 mL水,5 mL甲醇淋洗,10 mL2%氨水甲醇溶液洗脱,收集洗脱液,氮气吹干,用1 mL水溶解,过0.22 μm滤膜,上机检测
3.液相色谱条件
色谱柱:ChromCore C18 5 μm, 4.6×250 mm
流动相:甲醇:0.02 mol/L乙酸铵溶液梯度洗脱
时间 min | 甲醇 | 0.02 mol/L乙酸铵溶液 |
0 | 5 | 95 |
8 | 20 | 80 |
17 | 60 | 40 |
19 | 60 | 40 |
20 | 5 | 95 |
26 | 5 | 95 |
检测波长:254 nm
流速:1.0 mL/ min
柱温:30℃
进样量:10μL
实验谱图及回收率数据
标准品2 mg/kg
样品
样品加标2 mg/kg
加标回收率数据
保留时间 | 化合物中文 | 化合物英文 | 加标量 | 测定值 | 回收率 |
16.92 min | 诱惑红 | allura red | 2 mg/kg | 1.72 mg/kg | 86.0% |
实验结果
大豆蛋白豆皮中诱惑红,用氨化乙醇水溶液提取,固相萃取小柱净化,液相色谱检测,其回收率>80%,简单快速,便于检测。
公司名称:山东时进检测服务有限公司
色谱柱信息:ChromCore C18 5μm, 4.6×250mm
SelectCore WAX 150mg/6mL