LC-MSMS法同时分析血液中五种免疫抑制剂浓度

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2023/02/08

私聊

液质联用（LCMS）

LC-MSMS法同时分析血液中五种免疫抑制剂浓度

1、项目背景：

免疫抑制剂通过抑制淋巴细胞的功能，减少移植物排斥反应的发生，延长移植物存活时间。但由于不良反应较多，常常需要在低剂量发生移植物排斥和高剂量产生毒性之间取得平衡。临床常用的免疫抑制剂如环孢素Ａ（Cyclosporin A）、霉酚酸酯（Mycophenolate mofetil）、他克莫司（Tacrolimus）、西罗莫司（Sirolimus）、依维莫司（Everolimus）等，由于其治疗窗窄，其药动学存在明显的个体间差异，因此需要密切监测药物浓度，以确保处于安全有效的治疗范围。

2、实验部分

2.1 实验仪器

液相色谱质谱检测系统：AB SCIEX Triple Quad^TM4500MD

高速冷冻离心机：D1524R

2.2样本制备

取100 μL全血样本，加入100 μL硫酸锌水溶液，再加入300 μL含内标工作液，涡旋混匀1 min，将样品于4 ℃条件下14000 rmp 离心10 min，取200 μL上清于进样小瓶中，进行LC-MSMS分析。

2.3分析方法

Column: ChromCore BR C18 3μm，2.1×50mm（Part No.A301-030018-02105S）

Mobile Phase:A) 0.1%甲酸-2 mM乙酸铵-水

B) 甲醇

Gradient:2 min 40% B

Flow Rate:0.7 mL/min

Temperature:45 ℃

Injection:5 μL

3、实验结果

3.1色谱图

3.2标准曲线

霉酚酸（线性范围50~5000 ng/mL）、环孢素A（线性范围10~1000 ng/mL）、他克莫司（线性范围1~100 ng/mL）、依维莫司（线性范围1~100 ng/mL）、西罗莫司（线性范围1~100 ng/mL）在其线性范围内呈现良好的线性关系，r值均在0.99以上。

4、结论

本文建立了全血样本中霉酚酸、他克莫司、依维莫司、西罗莫司、环孢素A五种免疫抑制剂的LC-MSMS测定方法。采用色谱柱ChromCore BR C18分析霉酚酸、他克莫司、依维莫司、西罗莫司、环孢素A，结果显示，目标物保留强，峰形良好，分析时间短，满足日常检测需求。

色谱柱信息：纳谱分析ChromCore BR C18 3μm, 2.1×50mm